CDX2基因过表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理研究3.pdf

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广西医科大学学报
20029 J un ; 26 (3)
J OURNAL OF GUAN GXI MEDICAL UNIV ERSIT Y · 385 ·
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CDX2 基因过表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理研究
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崔建华李雷谢玉波1 肖强△
(广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科南宁 530021)
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摘要目的:利用基因表达谱芯片技术筛选 CDX2 高表达的胃癌 M GC803/ CDX2 细胞和对照组 M GC803/ EV 细胞中差异表达
的基因,探讨 CDX2 高表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理。方法: Trizol 一步法提取高表达 CDX2 的 M GC803/ CDX2 细胞和
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对照组细胞的总并纯化反转录合成荧光分子( ) 标记的探针与基因表达谱
M GC82032/ EV RNA , mRNA , Cy3/ Cy5 cDNA , 22 k
芯片进行杂交;采用 L uxScan 3 0 图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,最后以差异为> 2 倍或<
0 5 倍的标准来确定差异表达基因。结果:在 23 238 个基因中筛选出与细胞凋亡有关的差异性表达基因 15 条,其中 8 条基因
表达上调和 7 条基因表达下调。结论:CDX2 基因过表达促进胃癌细胞凋亡可能与这 15 条差异表达基因关系密切。
关键词凋亡;基因芯片;CDX2 ;差异基因
中图分类号:R735 2 文献标志码:A 文章编号:1005 930X(2009) 03 0385 03
同源盒转录因子 CDX2 (caudal related homeobox tran vitrogen) ,NucleoSpin RNA clean up 纯化试剂盒( MACH
scription factor 2) 属于同源盒基因( homeobox genes , Hox EREY NA GEL) ,晶芯 cRNA 扩增标记试剂盒(博奥生物有
genes) 家族中的一员,最早是由 Mlodzik 于果蝇中分离成功。限公司) ,RNA Clean up Kit (MN) 纯化试剂盒(博奥生物有
它是肠道特异性转录因子,不仅控制着胚胎细胞的发育分限公司) 。
化,而且在成人组织的分化和增殖调控中起着重要的作 1 3 方法: Trizol 一步法提取高表达 CDX2 的 M GC803/
用[1 ] 。研究表明,CDX2 表达下调引起结直肠癌发生过程中 CDX2 细胞和对照组 M GC803/ EV 细胞总 RNA ,采用 Nucle
分化丢失和增殖增加,这提示 CDX2 可能与其他基因一起共 oSpinRNA clean up 试剂盒对总 RNA 进行过柱纯化,用分
同参与了肿瘤的发生发展[2 ] 。我们前期研究表明:外源性的光光度计定量,甲醛变性胶电泳质检提取的 RNA 。以 T7
CDX2 高表达导致胃癌 M GC803 细胞生长受到明显抑制,且 Oligo (d T)