呼吸道标本的细菌培养11.10幻灯片.ppt

儿童呼吸道常见细菌培养鉴定技术
广州市妇女儿童医疗中心检验科
邓秋连
病原菌确定原则
自从发现细菌以来,已经确定上百种疾病的病原菌,对这些常见的传染病,通常只要检出已经确定的病原菌,就可以认定这种疾病的原因。
新出现的传染病,需要用确定病原菌的古老标准来确定。
对病人组织、器官中分离到的一种微生物,不足以说明就是疾病的原因。对于细菌性疾病,需要满足郭霍原则(Koch)。
郭霍原则的四个条件
从一种疾病病人中能有规律地发现一种细菌;
能够分离这种细菌获得纯培养;
把这种细菌的培养物引入易感动物体内,可以引起与病人类似的疾病;
在实验感染引起的疾病中,仍然能够分了同一种细菌。
只有能够满足所有四个条件,才能确定该种细菌室相应疾病的病原。
提纲
(一)呼吸道标本的采集。
痰标本是反映下呼吸道感染最直接的标志物,痰标本采集过程污染机会多,痰标本采集方便、无痛苦。
(二)合格的痰标本。
(三)呼吸道(痰)标本细菌培养存在的问题。
(四)呼吸道(痰)标本接种处理。
(五)呼吸道(痰)标本细菌报告。
(六)肺炎链球菌的分离培养技术。
(七)流感嗜血杆菌的分离培养技术。
(二)合格的痰标本。
痰标本留取后应先涂片, 进行革兰染色镜检合格后再接种。
镜检不合格标本, 应通知临床重新留取标本。
痰标本合格的标准:
痰标本鳞状上皮细白血球细菌种类
合格<=10/低倍>=10 1-3种
不合格>=25/低倍<=10 >3种
(三)痰标本细菌培养存在的问题。
痰标本不合格:痰标本已被唾液、食物、口腔细菌污染。
标本接种不及时:新入院病人用药前采集标本后未及时送检,到下午采集中送检。呼吸道常见细菌如流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等苛养菌是很娇的细菌,如不及时送检这些细菌均会死亡,尤其脑膜炎奈瑟菌需保温送检。标本应在采集后1小时内接种培养。
(三)痰标本细菌培养存在的问题。
培养基不合格:
肺炎链球菌、化脓性链球菌可以在绵羊血平板上生长,绵羊血不含X因子,所以流感嗜血杆菌、奈瑟菌在绵羊血巧克力平板上生长差或不生长,要加入一种含X因子的添加剂才能生长良好,而马血、兔血同时含有V和X因子,所以采用马血或兔血制的巧克力平板,流感嗜血杆菌、奈瑟菌生长良好。
痰标本的培养时间:
呼吸道(痰)标本培养应该为24~72小时。24小时培养后细菌生长稀少或未生长的平板应继续培养到72小时后再作报告,防止一些生长缓慢的细菌会遗漏,如卡他莫拉菌、奴卡菌、嗜血杆菌等。
(三)痰标本细菌培养存在的问题。