探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素.doc

探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素
(广西省来宾市金秀县人民医院广西来宾 545700)
【摘要】目的:探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素。方法:以双抗原夹心法对HIV抗体进行检测,分析在不同血清、不同孵育方式、不同血清量、不同孵育时间及显色终止后不同时间段比色对测定结果造成的影响。结果:对HIV抗体的影响因素主要包括不同血清量、不同孵育时间及加终止液后不同时间段比色。结论:双抗原夹心法检测HIV抗体时的主要影响因素包括血清量减少、孵育时间缩短及加终止液后的比色时间延长等。
【关键词】双抗原夹心法;HIV抗体;影响因素
【中图分类号】R37 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)01-0149-02
艾滋病又称为获得性免疫缺陷综合征,该病由免疫缺陷病毒引起,临床上以特异性HIV抗体诊断作为HIV感染的主要依据[1-2]。在本次调查中我院旨在重点分析双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素。现报告如下。

试剂与仪器
试剂:HIV抗体第三代(双抗原夹心法)诊断试剂盒,HIV抗体质控血清,由北京万泰有限公司生产提供。仪器:RT-6100酶标分析仪,RT—300自动洗板机,Hw1型电热恒温水浴箱。
方法
:阴性抗体来源于健康体检者,阳性抗体来自于我市疾控中心,并经灭活处理。
、溶血稀释样品的制备:取HIV阴性样品,处理后分离非溶血血清与溶血血清,后用该血清对HIV抗体阳性血清进行倍比稀释,测定溶血样品Hb浓度,同时对非溶血样品与溶血样品的相关情况进行比较。
、脂浊稀释样品的制备:取HIV阴性样品,处理后得到非脂浊、脂浊血清,后用该血清对HIV抗体阳性血清进行倍比稀释,测定各样品TG含量,同时对非脂浊、脂浊稀释样品的相关情况进行比较。
HIV抗体阳性样品的制备:取若干HIV阴性样品,离心分离血清,后于各血清内加入不同量的HIV抗体阳性血清,稀释成不同浓度的HIV抗体阳性样品。对各样品进行不同方式的孵育、不同血清量比较、不同孵育时间比较与显色终止后不同时间段比色比较。
统计学处理
,计数资料采用卡方检验,计量资料采用均数_+标准差表示,以P<。

非溶血样品与溶血样品比较
由结果可知,非溶血样品与溶血样品倍比稀释后的HIV抗体A值配对t检验比较差异无统计学意义(P>)。
非脂浊与脂浊样品的比较
由结果可知,非脂浊与脂浊样品倍比稀释后的HIV抗体A值配对t检验比较差异无统计学意义(P>)。
不同孵育方式对HIV抗体检测的影响
选取12份HIV抗体阳性样品,每份平行测定2孔。其中一份经水浴箱内培养,另一份经培养箱内培养,两组样品其余各培养条件均相同。由结果可知,两组A值配对t检验比较差异无统计学意义(P>)。
不同血清量和不同孵育时间对HIV抗体检测的影响
选取30份HIV抗体阳性样品,每份平行测定2孔。一组(正常组)血清100μl,孵育30min,一组(对比1组)血清50μl,孵育30min