地中海贫血.ppt

案例1
一位25岁的广西籍孕妇在其12周孕期时到医院妇产科进行首次产前检查,这是她的首次怀孕,她非常关注她怀的小孩患家族其他成员出现的一种遗传性血液病的风险。孕妇主诉轻度贫血史,但是没有向她哥哥那样严重,其哥哥患有严重的贫血,需要经常输血,10岁去世。该孕妇以往被诊断为贫血,但没有任何贫血的症状。体格检查符合12周妊娠,超声波检查确诊为12周宫内妊娠,血液检查显示为小细胞低色素贫血(血红蛋白(HB)浓度为90g/L),血红蛋白电泳分析显示血红蛋白A2(HbA2)含量增高(%),胎儿血红蛋白量也增高,符合轻型β-地中海的表现。为了检查胎儿是否患有地中海贫血,孕妇进行了绒毛膜穿刺检查,几个小时后得到诊断结果。
诊断:β-地中海贫血
CD41-42(-TCTT)缺失突变
简介
地中海贫血(在香港叫链状细胞性贫血)按照受累的氨基酸链来分类,主要有α地中海贫血(α链受累)和β地中海贫血(β链受累)。也可按照一个或两个基因缺损来分为轻型或重型地中海贫血。α地中海贫血多见于黑人(黑人中25%至少有一个基因缺陷),β地中海贫血多见于地中海地区或东南亚
发病机制
本病是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致。组成珠蛋白的肽链有4种,即α、β、γ、δ链,分别由其相应的基因编码,这些基因的缺失或点突变可造成各种肽链的合成障碍,致使血红蛋白的组分改变。通常将地中海贫血分为α、β、δβ和δ等4种类型,其中以β和α地中海贫血较为常见。
问题:
1:β-珠蛋白基因有多少个外显子?mRNA序列与编码之间有何联系?
2:β-地中海贫血的分子基础是什么?中国人群中有哪种最常变的突变?这些突变对该基因的表达有何影响?
3:如何检查-地中海贫血?寡苷酸探针杂交、反向点杂交、等位基因特异聚合酶链的反应,限制性内切酶分析检测方法的生化基础是什么?
4:目前有哪些先进的诊断方法?
5:为什么患者HbA2增高?
β珠蛋白肽链含 146个氨基酸,由β珠蛋白基因所编码。
珠蛋白基因全长 1605 bp,含 3个外显子和 2个内含子。mRNA与编码序列有包含和被包含关系,编码序列位于mRNA中,编码序列与mRNA序列都是会有碱基排序的序列。
内科第 3卷第 3期
[文章编号] 16732 7768 (2008) 032 04372 04
β-地中海贫血的分子基础:
β珠蛋白基因簇在11号染色体短臂上,包含5个功能基因和1个假基因,功能基因结构中有3个编码序列(称为外显子)被2个插入序列(称为内含子)所分开,经过切除内含子拼接外显子,在5’端加上“帽”结构,3’端加上多聚腺苷酸、转录的mRNA便形成为成熟的mRNA。
β珠蛋白生成障碍性贫血是由于位于11号染色体短臂的两个β珠蛋白基因或者与其相关的DNA序列发生点突变,在转录、RNA的加工及翻译过程中出现各种障碍,导致β珠蛋白合成不足或缺如。
。——《临床血液学》/罗绍凯,洪文德,李娟主编。—北
京:科学出版社
由于β一珠蛋白基因在一条染色体上只有1份,发生不等交换的机会极少,因此大约只有1%的β-地中海贫血是由于基因缺失而引起的,且大部分都发生在11号染色体短臂β一珠蛋白基因簇5’上游的β-位点控制
区(5-locus control region,5-LCR)。大量研究表明,绝大多β-地中海贫血都是因β一珠蛋白基因不同类型的点突变所致。这些突变分别导致转录受阻,mRNA前体剪接加工错误,翻译无效,或合成不稳定的珠蛋白而阻碍α一β二聚体的形成,使珠蛋白链不平衡等。

中国人群中有5 种热点突变, 以 CD17 ( A →T)、- 28M( A→ G) 、 CD41 /42 ( -TTCT) 、IVS -II - 654( C →T) 和 CD71 - 72( + A) 最多见, 约占突变类型的90%
CD17(A→T)
正常β﹣珠蛋白基因序列:
CTGT GGGGCAAGGT GAAC
突变的序列: ↓
CTGT GGGGCTAGGT GAAC
突变的影响:因为DNA序列的CD(A →T ),产生终止密码子TAG,使肽链合成提前终止, β链合成减少,产生无义突变。
﹣28(A →G)
正常的DNA序列:
GACATAAAAG
突变后: ↓
GACATGAAAG
突变的影响:该类突变集中在-28~-31之间,这个 区域富含TATA盒, TATA盒是真核生物上游特异序列,与RNA聚合酶识别转录有关,这类突变破坏TATA盒,导致β-珠蛋白模板DNA不能转录出mRNA.
CD41/42(-TTCT)
正常DNA序列:
CAGAGGTTC TTTGAG
突变后:
CAGAGGTTG AGTCTT
影响:因为编码β-珠蛋白的基因序列在CD41/42缺失了TTCT,使CD59位上提前出现终止密码子T