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第五章细胞融合









细胞融合是20世纪60年代发展起来的一项细胞工程技术。细胞融合(Cell fusion)又称体细胞杂交(Somatic hybridization),是指将不同来源的原生质体(除去细胞壁的细胞)相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。

可应用于遗传性状改良、克服远缘杂交不亲和、培育出理想的新品种。
可以使用两个亲株的结构基因与调节基因之间发生重组,也可以使两亲株的结构基因重组,从而产生新的杂种化合物。
创造细胞质杂种。

对于植物细胞而言,首先将体细胞经酶解除去其细胞壁,得到原生质体;而后通过物理或化学方法诱导其细胞融合形成杂种细胞;继而再进行杂种细胞的分检和培养,促使种间的转移。
在适宜的条件下来培养,长成的生物个体就是一个新的物种或品系。
细胞融合的发展历史
1858年菲尔绍夫(Virchow)途述了正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞情况。1875年兰格(lange)第一个观察到血液细胞中的合并现象。1962年日本冈田善雄发现HVJ能引起细胞的融合现象。1965年英国海利斯等进一步证实了灭活的病毒在适当条件下可以诱发动物细胞融合。20世纪70年代初高国楠发现聚乙二醇(PEG)能促进植物原生质体融合。


除去细胞壁后获得原生质体,因此也称原
生质体融合

组织获得的方法同动物细胞培养,组织消化液常用胰蛋白酶与胶原酶
——仙台病毒法
很多病毒都具有凝集细胞的能力,它一边黏接在一个细胞表面,另外一边黏接在另一个细胞表面,从而使两个细胞在病毒的作用直靠近发生凝结。这就是仙台病毒法的基本原理。
仙台病毒(sendal virus)也称日本血凝病毒HVJ,属黏液病毒副流感类群,是RNA病毒,多型颗粒状,可以使感染细胞表面发生某些改变促使细胞容易发生融合。仙台病毒已成为产生细胞杂种的标准融合剂。
——仙台病毒法
1、原生质或细胞在病毒黏附作用下靠近
2、两个细胞膜互相渗透胞质互相渗透
3、两原生质体或细胞核相互融合、融为一体
4、进入正常细胞分裂途径,分裂成含有两套染色体的杂种子细胞