植物细胞骨架的光学显微观察
实验目的
通过对洋葱鳞茎细胞的处理,掌握植物细胞骨架的制备方法与原理。
掌握考马斯亮蓝R250 对植物细胞骨架染色的方法。
观察光学显微镜下细胞骨架的结构
实验原理
细胞骨架(cytoskeleton)概念是指真核细胞中的蛋白纤维网络结构。
在维持细胞形态,承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用,
参与许多重要的生命活动,如:在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离,在细胞物质运输中,各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向转运;在肌肉细胞中,细胞骨架和它的结合蛋白组成动力系统;在白细胞(白血球)的迁移、精子的游动、神经细胞轴突和树突的伸展等方面都与细胞骨架有关。
在植物细胞中细胞骨架指导细胞壁的合成。
实验原理植物细胞骨架的观察
细胞骨架
微观
微丝
中间纤维
实验原理植物细胞骨架的观察
显示细胞骨架的非特异性方法
Coomassie Blue
Triton X-100可溶解抽提细胞中的蛋白质和脂质,但不破坏细胞骨架系统。
戊二醛固定、考马斯亮蓝R250染色后,光学显微镜可观察到网状结构细胞骨架,主要成分为直径40nm左右的微丝束。
实验原理植物细胞骨架的观察
本实验观察洋葱鳞茎细胞骨架
实验原理植物细胞骨架的观察
洋葱鳞茎细胞骨架
实验用品
器材:显微镜、50ml烧杯、滴管、容量瓶、载玻片、盖玻片、镊子。
试剂:
。
%Triton X-100,用M-缓冲液配。
%考马斯亮蓝R250
%戊二醛。
%、7%、95%乙醇。
、正丁醇、二甲苯、树胶。
材料:洋葱鳞茎。
实验方法
取洋葱鳞茎内表皮细胞(约
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