组织培养技术(201401012).ppt

细胞培养技术
辽宁医学院药理学教研室
金英
2018/1/4
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一、组织培养的基本概念
Tissue culture: 从体内取出组织摹拟体内的生理环境,在无菌、适当温度、和一定营养条件下,使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。
体外培养
In Vitro
Tissue culture
Cell culture
Organ culture
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细胞培养
培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中,由于环境的改变,细胞的移动或受一些其他因素的影响,培养时间加长,传代导致细胞出现单一化型。
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器官培养
器官培养:与组织培养条件相似,培养的是器官的原基,器官的一部分或整个器官,以便能够在体外生存、生长和保持一定功能的方法。
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细胞培养目的与用途
1、科学研究:药物研究开发与基础研究
(1) 新药筛选:(2) 疫苗研究与开发: (3) 基因工程药物研究与开发: (4) 细胞工程药物研究与开发: (5) 单克隆抗体制备: (6) 药物作用机理(6) 基因功能(7) 疾病发生机理
2、生物制药
(1) 疫苗生产: (2) 基因工程药物生产: (3) 诊断用和药用单克隆抗体生产
(4) 细胞工程药物生产:
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对组织培养的评价
优点:1、直接观察活细胞的形态结构和生命活动。2、便于用各种不同技术方法研究细胞。3、培养细胞携带有与体内细胞同等的基因组,广泛用于分子生物学和基因工程研究。4、同时提供大量的生物学性状相似的实验对象。
不足:利用培养细胞做实验对象时,不应视为与体内细胞一样。
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组织培养的发展简史
1、早期组织培养: Roux(1885) 用温NS培养鸡胚。Jolly(1903)用盖片悬滴法培养蝾螈白细胞。Beebe and Ewing(1906)培养狗淋巴细胞。
2、现代组织培养:Harrison(1907) and Carrel(1912)开始, Harrison培养蛙胚神经组织。 Carrel培养了鸡胚心肌组织。
3 从50年代起,组织培养技术快速发展。试管培养
培养瓶
培养板
单层细胞培养
1957 o
细胞系、克隆细胞株
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组织培养细胞生物学
一、体内外细胞的差异
“反祖”(Atavism)现象:细胞失去原有组织结构和细胞形态、分化减弱或不显;表现为细胞趋于单一化,或获得永生性,或变成具有恶性性状的细胞群。
二、培养细胞的分化
1、不适应(deadaption) 细胞在原体内时所拥有的分化特征减弱或不显。(培养的肝细胞酪氨酸转移酶特性丧失)。生存条件改变使分化阻抑。
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2、脱分化或去分化(Dedifferentiation):
细胞失掉发生分化的能力(培养的肝细胞失掉产生精氨酸酶、氨基转移酶等特性后,则失去储存肝糖原能力)。是基因突变所致
培养细胞在体外生存时间与其分化能力呈反向关系。
细胞分化的关键在于是否存在有诱导细胞发生分化的因子。
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培养细胞的形态分类根据是否附于支持物上生长的特性,分为:  贴附型悬浮型

(一)贴附型
细胞贴附在支持物表面生长,只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。
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