NIPT产前筛查染色体异常及高风险Z值分类的意义.pdf

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养箱巾培养7d,先换研究对象均行NIPT检测且在知情同意书上液、冉转种,约1Od左右根据细胞生长情况收取细签字。本研究经过本院伦理委员会审批通过胞。用秋水仙素终止羊水细胞生长,刮取培养瓶壁(I。1202309)。上细胞,***化钾低渗18min、预固定、第一次固定、二、检测方法第二次固定、滴片、烤片、:胎儿染色体非整倍体2l一制备羊水染色体片,仪器扫片。每个标本至少计数三体、18三体和13三体检测试剂盒(半导体测序20个分裂相,分析5个完整核型。法)、DA8600高通量测序仪(广州达瑞);染色体核三、随访型分析的培养基(广州白云山);产前荧光原位杂跟踪孕妇的妊娠结局,进行产前产后随访,通过交检测试剂盒(北京金菩嘉);ThermoBritc杂交仪随访判断有无其他异常情况、假阳性或假阴性的情(赛默飞,美国);奥林巴斯荧光显微镜(()lympus,况出现,以分娩后无异常为阴性。日本);全自动染色体显微图像扫描系统(上海北四、统计学分析昂)。本研究中的计数资料采用百分率(%)表示,:采用EDTA抗凝管采集孕妇进行描述性统计分析。静脉血2管,各5ml,4℃可保存8h。血浆分离,结果298lrpm,4℃离心10min;分离后的m浆于12900rpm,4℃离心10min。采用磁珠法提取孕妇一、NIPT检测、FISH及细胞染色体核型分析m浆巾的游离DNA,文库构建、PCR扩增、上机测结果序、通过DA8600prot。n平台进行生物信息分析,本研究共纳人研究对象7478例。NIPT检测得到Z值。为染色体异常的有62例,%(62/7478),:Z值公式如下:其中2li体高风险44例(%)、18i体高风险万方数据:..生殖医学杂志2023年12月第32卷第12期12例(%)、13三体高风险5例(%)、%(12/7428),假阴性率为O(表3)。色体异常l例(%)。62例高风险孕妇巾有54表2NIPT筛查胎儿染色体非整倍体的检测例自愿接受羊水穿刺,50例在我院经FISH技术及结果不同z值分布情况比较(%)染色体核型分析,其中40例得到确诊(2卜i体29例、18一三体9例,13一三体1例、x一三体1例);有4例在外院进行了羊水穿刺,其中3例为21一三体、1例正常。其余8例高风险孕妇拒绝羊水穿刺,后期追踪随访得知:5例直接引产,经胎盘验证,4例为2卜三体,1例为13三体;1例个人原因产下一21三体患儿;1例双胎,其中一个胎死宫内诊断为21三体,另一个34周剖宫产为正常婴儿;l例18i体高风险产下正常胎儿。经计算,NIPT对2li体、18i体和13i体阳性预测值(PPV)%(38/表3NIPT阳性结果筛查效率分析(%)44)、%(9/12)、%(2/5);NIPT与FISH及染色体核型结果分析显示,符合率21一三体、%(29/35)、%(9/11)%(1/3)(表1)。表lNIPT与FISH及染色体核型结果分析(%)讨论传统的染色体非整倍体筛查手段是妊娠早期前3个月母体血清生化标志物妊娠相关蛋(PAPPA)和人绒毛膜促性腺激素(口HCG)检测,结合颈项透注:本研究中,NIPT检测异常的62例中仅有50例在我明层厚度(NT)超声检测;也有在妊娠中期进行甲胎院做了FISH及染色体核型分析。蛋白(AFP)、游离雌三醇(uE。)和J3一HC(;二联或三联检测并结合NT超声检测进行筛查。筛查结果风二、根据不同Z值筛查三种遗传疾病的假阳性险高的孕妇,需进行胎儿细胞染色体核型分析,有羊率比较水细胞培养和绒毛细胞培养两种方法,分别通过羊排除掉1例性染色体异常,将其余61例高风险膜穿刺和绒毛膜取样进行。但是目前的筛查手段仅按z值大小分为四组进行分析,结果分布情况见表能检出50%~95%的异常,漏检率很高,而且假阳2。A组13例,假阳性9例,%;B组14例,假阳性2例,%;c组19性率高达5%。%…J,例,假阳性1例,%;D组15例,假即1000个筛查阳性结果中只有34个为真阳性,导阳性为o。假阳性主要集中在3≤Z≤5,Z值越高假致本不必要接受羊水穿刺的孕妇数量大大增加,不阳性率越低(表2)。但有流产的风险(1%~2%)…,而且还给孕妇带来三、NIPT阳性结果筛查效率了严重的焦虑,可能导致后代神经发育和精神异FISH及细胞染色体核型分析异常与NIPT阳常7。NIPT对胎儿染色体非整倍体的筛查具有较性结果筛查效率分析结果显示,NIPT诊断胎儿染高的准确性、%(50/50),率。8。,通过对母血中cffDNA进行基因检测,%(7416/7428),总假阳性率为胎儿的早期诊断有效性,减少风险事件的发生,最大万方数据:..生殖医学杂志2023年12月第32卷第12期程度上了解胎儿的生长情况,为后续的治疗和生产来探讨Z值的范围和假阳性率的关系,结果显示Z提供相应的参考依据“’。值在3~5时假阳性率高,并且随着z值的增高假本研究7478例孕妇标本中NIPT检出染色体阳性率逐渐减小,显示Z值大小与PPV呈正相关,非整倍体异常高风险62例,其中2卜i体44例,18与既往研究相符口6。2…。对NIPT高风险的Z值进i体12例,13j体5例,X_i体1例,阳性检出率行适当分类及划分能进一步提高21三体、18三体、%(62/7478),国内类似报道中染色体非整13_i体在不同区问内的真阳性数,%、%、1.¨%和临床医师对高风险孕妇进行遗传咨询[1…,%“。卜1。把NIPT高风险与羊膜腔穿刺液NIPT高风险巾z值与真假阳性分布的相关性,提FISH检测及细胞染色体核型分析以及后续的追踪升NIPT高风险孕妇Z值在3~12之问时进行产随访作为金标准进行比较,PPV分别为2卜i体前诊断的依从性,%(38/44)、%(9/12)、13三体险而放弃产前诊断进而选择直接引产的孕妇人数。%(2/5),性染色体异常样本量少不作为研究。结合Z值和不同风险因素可对NIPT检测高风险人朱赛娟等”的研究中,这三种异常的PPV分别为群提供更准确的遗传咨询。%、%%,略低于本研究。本研究主综上所述,NIPT检测对一些非整倍体染色体要以2卜j体和1弘i体检出为主,13号染色体PPV异常如唐氏综合征以及爱德华氏增多有较高检卅较低,说明NIPT技术可快速准确地检测胎儿21号率,但是NIPT还具有较低的假阳性率,不能完全取染色体和18号染色体的非整倍性,虽然NIPT不是代有创产前诊断。本研究NIPT胎儿染色体非整倍诊断试验,但是与标准筛查相比,敏感性、特异性、%,主要以2卜i体和性预测值和阴性预测值等诊断指标更为理想,大大18i体检出为主。筛查结果为阳性或高风险时,孕减少了很多不必要的介入性检查;并且假阴性率低,妇通常对检测结果表现出焦虑和难以接受,应在对具有很好的临床应用价值。NIPT虽然是一种优于结果进行解释后,给予孕妇一定的时间考虑再做决常规血清学检测的无创产前诊断手段,检测敏感性定。在对结果解释时,应告知孕妇阳性预测值,并对较好,但特异性受限导致NIPT不能彻底取代介入造成假阳性的原因进行说明。由于在检测前遗传咨性产前FISH、染色体核型分析、基因芯片等产前诊询时对敏感度、特异性进行了介绍,再加上某些宣传断方法。会造成孕妇认为NIPT结果的准确性很高,因此需NIPT是利用孕妇外周血cffDNA,结合高通量要对孕妇认真解释准确性高和阳性预测值的区别。测序技术和生物信息学方法,准确判断胎儿是否患某些情况下,孕妇会希望直接终止妊娠,这时应强调三大染色体疾病的检测技术。孕妇在妊娠期问,血接受产前诊断的重要性,确认孕妇在已经充分理解浆中胎儿游离DNA(cffDNA)大部分源于母体自身假阳性结果的情况下做出这一决定。当NIPT检测细胞凋亡和胎盘绒毛膜滋养层细胞脱落降解释放的结果为3≤Z≤5时,应该引起实验室人员和临床医cffDNA,通常认为这部分cffDNA能较准确地体现生的重视,存在假阳性概率比较大,建议孕妇进一步胎儿的遗传物质。NIPT与胎儿的直接检测不同,做介入性产前诊断。其可能会出现假阳性或假阴性等问题。本研究经【参考文献】FISH和核型分析验证检出1l例假阳性,假阳性率L1JDownJI,.()%(12/7478),这可能与染色体拷贝数变异、1866[J].MentRetard,l995,33:、母体嵌合等生物因素有关,具体原[2][M].:科学出版因需进一步研究。无创产前检测对染色体非整倍体社,2018:,NIPT提示低风险的3I,oYM,。,1997,350:Z值参考范同为(3,+3),当Z参考范罔<3或485487.>3时即判定为染色体为非整倍体,此时NIPT报N。rtonGK,[4]ME,JacobssonB,swamy告提示为高风险,建议孕妇进行遗传咨询并行产前analysisf()rn()ninvasiveexaminati()n()ftrisOnly[J].NEnglJ诊断。本研究通过把NIPT高风险的Z值分为四组Med,20l5,372::..·1848·生殖医学杂志2023年12月第32卷第12期[5]wr碴htD,syngelakiA,BradburiI,[J].。rtrisomies21,18and13byL】lLras。undand34:。chcmicaltcsting[J].FetalDiagnThcr,2014,35:]18126.[14]陈珏,朱…J萍,[6]AkolekarR,BetaJ,iarelllG,[J].中围产前诊断杂忐(电子版),ofmlscarriagefollowingamnlocentesisandchononlcvillus2023,15::asystenlaticrevicwandmetaanalysis[J].[15]朱赛娟,张月萍,伍俊萍,。und()bstetGynecol,2()15,45:[J].现代妇产科进展,2()17,26:[7]Gl。。n,;whatneedstobedone[J].Best[16]TianY,ZhangI,,TlanW,。fPractResClin()bstet(;vnaecol,2014,28:[8]榻淑霞,谢小雷,陈晨,,()yst11ei()npr()t()nsemic。nduct。r色体非整倍体检测巾的临床应用[J].分子诊断与治疗杂志,sequencingplalform[J].M。,2()18,11:,14:.[17]ZhouI,,ZhangB,I,iuJ。。ptimal【L1t。ffvaluc。fZ[9]XuI。,HuangH,,:multicenterstudyof3l5l5prenatalscreenlng[J].Front(;enet,202l,12:()npregnanciesins()utheastern(、hina[J].ultras()und[18]JunlluiW,RuI。.QiuxiaY,()n()ft11eZsc()re()bstetGvnec。1,2()20,55:。fn。ninvasiveprenataltestingforfetaltrisomies13,[10]纪霞,付晓玲,千燕,,2021。41:体异常核型分布评估NIPT的临床应用[J].,2020,26:29002903.[19]赵干业,代鹏,胡爽,[11]徐云芝,徐雪琴,[J].巾华医学杂志,2022,102:色体1F整倍体疾病筛查巾的临床价值[J].,2022,52:294299.[20]莫俊,任峻青,杨立黔,等.?创产前检测筛查高风险病例真[12],[J].中华医学遗传学杂志,筛查中的应用价值[J].中华检验医学杂志,20l9,42:2022,39:.[13]罗艳梅,胡华梅,徐聚春,[编辑:张瑶楠]万方数据