2022-2023学年山东省临沂市沂水县高二下学期期中生物试题.pdf

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实验思路鉴定上述过程获得的突变产物AD是否为突变基因:___________。:..(2)PCR可用于扩增未知序列,其原理如下图所示。下图链状DNA分子内侧是已知序列,外侧为未知序列。①不直接在图2中DNA分子的两端设计引物并进行扩增,原因是___________。②图3中环状DNA进行PCR的过程中,沿引物A延伸子链的延伸方向是___________(填顺时针”或“逆时针”),PCR产物___________(填“含有”或“不含”)EcoRI的酶切位点。以下是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料:资料1:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以改造出了图1所示的pPIC9K质粒[5'AOXI和3'AOXI(TT)分别是基因AOXI的启动子和终止子]用作载体,其与目的基因HBsAg形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中已实现表达。注意HBsAg基因中的白色箭头表示转录的方向资料2:限制酶酶切位点:..SnaBIAvrIISacIBg1II识别序列及酶切位点(1)用PCR技术扩增HBsAg基因时所需TaqDNA聚合酶需要___________激活。此过程中需要添加引物的原因是_________________。(2)为实现HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,设计引物时需要在引物的___________端添加相应限制酶的识别序列,则在HBsAg基因两侧的A和B位置添加的碱基序列分别是___________、___________,这样设计的优点是___________。(3)酶切获取HBsAg基因后,需用___________(填连接酶或“T4DNA连接酶”)将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,构建重组质粒的目的是___________。(4)若用限制酶SnaBI,BglII联合酶切pPIC9K质粒,获得的DN***段的长度分别是36kb,25kb,65kb;用限制酶BglII、AvrII联合酶切pPIC9K质粒,得到的DN***段的长度分别是36kb,36kb、54kb;已知HBsAg基因长度是52kb。步骤3中应选用限制酶___________来切割重组质粒以获得重组DNA,切割后的重组DNA的长度是___________。