应用分子生物学技术探究小鼠急、慢性肝损伤.pdf

兰州大学
硕士学位论文
应用分子生物学技术研究小鼠急、慢性肝损伤
姓名:齐蕊
申请学位级别:硕士
专业:生物物理学
指导教师:王勤
20060501
论文作者签名:墼导师签名:鼻日期:��担�盘查日期:炒��、谚原创性声明关于学位论文使用授权的声明本人郑重声明:本人所呈交的学位论文,是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等,均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外,不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定,同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权兰州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为兰州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。
摘要成��。在正常组和模型组��中,用��┰鯟����、���、增加趋势。因此,这些基因可作为用分子生物学方法检测酒精性肝损伤的候选指型:小鼠腹腔注射�%��夯ㄉ�腿芤��:����后检测到血清中���示��S盏嫉募毙愿嗡鹕诵∈竽P统闪ⅰH缓笪颐窃诟媚P椭醒罢矣胝�J蟾����际醴醋B汲蒫�����盖小⒔油妨�印⒘铰窒�踉咏患傲铰忠种�基因的��消减文库;��婊�粞��鲅粜钥寺〗�蠵�鉴定,其中有小鼠酒精性肝损伤分子生物学检测指标的探讨目前酒精性肝损伤的发病率呈逐年上涨趋势,对酒精性肝病的诊断需要多种指标相互验证。本文拟探讨若干基因作为肝损伤分子生物学检测候选指标的可行性。首先取小鼠��凰婊�殖烧�W楹透嗡鹕四P妥椋����肽P妥樾∈蠊�喂酒精。于第�堋⒌��芗觳獾侥P妥樾∈笱G錋�活性有所升高,�、���肯灾�陆担�鳪�含量无明显变化;肝组织病理切片显示肝细胞结构被破坏,有脂肪变性以及淋巴细胞浸润等特征。提示酒精诱导的小鼠肝损伤模型成立。然后分别提取模型组和正常组小鼠肝组织���璖��技术反转录�龌�蚱�稀=峁�允疽陨匣�蛟谀P妥橹械谋泶锞��著高于正常组;且随损伤程度加深,����一�����、�.�表达量亦呈标。本实验为在分子水平上进行肝损伤的检测提供理论依据。用��椒ü菇–�诱导小鼠急性肝损伤组织与正常肝组织差异表达基因的��文库本文利用抑制性消减杂交方法构建了��S盏夹∈蠹毙愿嗡鹕俗橹�胝��肝组织差异表达基因的��文库。首先建立��诱导急性肝损伤的小鼠模』�筎活性均明显升高,�、���肯灾�陆担珿�含量无明显变化;病理切片显示肝细胞有气球样变性、小叶结构模糊、血管充血、部分淋巴细胞浸润。提组织差异表达的基因并构建消减��文库:��直鹛崛「巫橹痬����性���沟貌钜毂泶锏腸���蔚靡愿患���用�疉克隆构建差异表达�个克隆有�����的插入片断,证实建库成功。该��文库的构建为进一步筛选出代表急性肝损伤组织与正常肝组织差异表达的��片段,并对这些��进行序列测定、序列同源性分析以及进行完整基因的克隆、鉴定奠定了基础;为基因药物和诊断基因芯片的研发提供了依据。关键词:酒精性肝损伤、��诱导的急性肝损伤、基因的差异表达、��文库、抑制性消减杂交�����一�������兰卅�笱�妒垦芯可�畚�应用分子生物学技术研究小鼠急、慢性肝损伤
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