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2024年(生物科技行业)分子生物学试题及答案(整理版).pdf


文档分类:高等教育 | 页数:约18页 举报非法文档有奖
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】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。:..(生物科技行业)分子生物学试题及答案(整理版):..分子生物学试题及答案壹、:cDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。:蛋白质二级结构单元α-螺旋和β-折叠通过各种连接多肽能够组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都能够用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMPreceptorprotein),cAMP和CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivatedprotein):DN***段上的壹段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。:互补干扰RNA或称反义RNA,和mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。::在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。:在操纵区和结构基因之间的壹段能够终止转录作用的核苷酸序列。:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生壹个应急反应,停止全部基因的表达。产生这壹应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp和pppGpp的作用不只是壹个或几个操纵子,而是影响壹大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。:是指对启动子的活性起到壹种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。:是带有标记的壹段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。:..:是核糖体和mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。:只针对单壹抗原决定簇起作用的抗体。:是经过人工构建的壹种外源DNA载体,保留噬菌体俩端的COS区,和质粒连接构成。-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-***-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。:在DNA中壹段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’:用于扩增已知壹端序列的目的DNA。在未知序列壹端加上壹段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。:真核蛋白的基因和外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白和外源蛋白结合在壹起所组成的蛋白质。二、(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。(自体催化)、(异体催化)俩种类型。(IF-1)、(IF-2)和(IF-3)。(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。:..(结构分子生物学)、(基因表达和调控)、(DNA重组技术)三部分。(肺炎球菌感染小鼠)、(T2噬菌体感染大肠杆菌)这俩个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。:(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、(mRNA的5′末端被加上壹个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了壹个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。(亚基对DNA的利用来说是壹种经济的方法)、(能够减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。(成核)、(结构充实)、(最后重排)。;壹方面(能够作为碳源供细胞生长);另壹方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要壹个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要壹个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从(S2)开始,无G时转录从(S1)开始。(基因克隆)或(分子克隆)。最终目的是(把壹个生物体中的遗传信息DNA转入另壹个生物体)。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另壹DNA分子上(克隆载体),形成壹个新的重组DNA分子。②将这个重组DNA分子转入受体细胞且在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。:..④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。13、质粒的复制类型有俩种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为(松弛型质粒)。:a、被分离的目的基因俩条链各壹端序列相互补的DNA引物(约20个碱基左右)。b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。c、dNTPd、:(变性)、(退火)、(延伸)三个阶段。16、转基因动物的基本过程通常包括:①将克隆的外源基因导入到壹个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中;②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;③完成胚胎发育,生长为后代且带有外源基因;④利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜,培育新的纯合系。(脾B)细胞和(骨髓瘤)细胞杂交产生的,由于(脾细胞)能够利用次黄嘌呤,(骨细胞)提供细胞分裂功能,所以能在HAT培养基中生长。(多克隆抗体)、第二代(单克隆抗体)、第三代(基因工程抗体)。,表当下引入(外源毒蛋白基因);(扰乱昆虫正常生活周期的基因);(对病毒基因进行修饰)。Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是(TFIID)、(SP-1)和(CTF/NF1)。:..Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是:(D、A、B、E)。其中TFII-D的功能是(和TATA盒结合)。,转录因子和DNA结合的功能域常见有以下几种(螺旋-转角-螺旋)、(锌指模体)、(碱性-亮氨酸拉链模体)。(在对称轴5'侧切割产生5'粘端)、(在对称轴3'侧切割产生3'粘端)(在对称轴处切割产生平段)。:(SC构型)、(oc构型)、(L构型)。在电泳中最前面的是(SC构型)。,主要有(大肠杆菌)、(酵母)、(昆虫)和(哺乳类细胞表)。:(逆转录病毒感染法)、(DNA显微注射法)、(胚胎干细胞法)。三、?转运RNAtRNA转运氨基酸;核蛋白体RNArRNA核蛋白体组成成;信使RNAmRNA蛋白质合成模板;不均壹核RNAhnRNA成熟mRNA的前体;小核RNAsnRNA参和hnRNA的剪接;小胞浆RNAscRNA/7SL-RNA蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分;反义RNAanRNA/micRNA对基因的表达起调节作用;?原核生物TTGACA---TATAAT------起始位点-35-10真核生物:..增强子---GC---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点-110-70-?天然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必须对之进行改造构建:a、加入合适的选择标记基因,如俩个之上,易于用作选择,通常是抗生素基因。b、增加或减少合适的酶切位点,便于重组。c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。d、改变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。e、?制备俩种细胞群体,目的基因在其中壹种细胞中表达或高表达,在另壹种细胞中不表达或低表达,然后通过杂交对比找到目的基因。例如:在肿瘤发生和发展过程中,肿瘤细胞会呈现和正常细胞表达水平不同的mRNA,因此,能够通过差示杂交筛选出和肿瘤相关的基因。也可利用诱导的方法,筛选出诱导表达的基因。?脾B细胞+骨髓瘤细胞,加聚乙二醇(PEG)促进细胞融合,HAT培养基中培养(内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T)生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。细胞融合物中包含:脾-脾融合细胞:不能生长,脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞:不能利用次黄嘌呤,但可通过第二途径利用叶酸仍原酶合成嘌呤。氨基蝶呤对叶酸仍原酶有抑制作用,因此不能生长。骨-脾融合细胞:在HAT中能生长,脾细胞能够利用次黄嘌呤,骨细胞提供细胞分裂功能。:..6、利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA壹级结构的原理和方法?原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,壹旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进壹步延长。根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有俩种可能性,壹是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下壹个ddNTP。根据这壹方法,就可得到壹组以ddNTP结尾的长短不壹的DN***段。方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后,聚丙烯酰***凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。7、激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMPreceptorprotein),cAMP和CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivatedprotein)。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。壹些依赖于CRP的启动子缺乏壹般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。因此RNA聚合酶难以和其结合。CAP的存在(功能):能显著提高酶和启动子结合常数。主要表现以下二方面:①CAP通过改变启动子的构象以及和酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便和-10区结合,起到取代-35区功能的作用。②CAP仍能抑制RNA聚合酶和DNA中其它位点的结合,从而提高和其特定启动子结合的概率。8、典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?a、提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另壹DNA分子上(克隆载体),:..形成壹个新的重组DNA分子。b、将这个重组DNA分子转入受体细胞且在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。9、基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法且简述过程。抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选或PCR筛选、差式筛选、DNA探针多数克隆载体均带有抗生素抗性基因(抗氨苄青霉素、四环素)。当质粒转入大肠杆菌中后,该菌便获得抗性,没有转入的不具有抗性。但不能区分是否已重组。在含有俩个抗性基因的载体中,如果外源DN***段插入其中壹个基因且导致该基因失活,就可用俩个分别含不同药物的平板对照筛选阳性重组子。如pUC质粒含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-***-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。10、说明通过胚胎干细胞获得转基因动物的基本过程?胚胎干细胞(embryonicstemcell,ES):是胚胎发育期的胚细胞,能够人工培养增殖且具有分化成其它类型细胞的功能。ES细胞的培养:分离胚泡的内层细胞团进行培养。ES在无饲养层中培养时会分化为肌细胞、N细胞等多种功能细胞,在含有成纤维细胞中培养时ES将保持分化功能。能够对ES进行基因操作,不影响它的分化功能能够定点整合,解决了随机整合的问题。向胚胎干细胞导入外源基因,然后植入到待孕雌鼠子宫,发育成幼鼠,杂交获得纯合鼠。蛋白质的生物合成(壹)名词解释:..(translation):以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参和下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。(codon):mRNA中碱基顺序和蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是通过密码实现的,mRNA中每三个相邻的碱基决定壹个氨基酸,这三个相邻的碱基称为壹个密码子。(degeneracy):—个氨基酸具有俩个之上密码子的现象。(synonymcodon):为同—种氨基酸编码的各个密码子,称为同义密码了。(wobblehypothesis):指反密码子的前俩个碱基(3’-端)按照标准和密码子的前俩个碱基(5’-端)配对,而反密码子中的第三个碱墓则有某种程度的变动,使其有可能和几种不同的碱基配对。(frame-shiftmutation):在mRNA中,若插入或删去壹个核苷酸,就会使读码发错误,称为移码,由于移码而造成的突变、称移码突变。7,同功受体(eptor):转运同壹种氨基酸的几种tRNA称为同功受体。(anticodon):指tRNA反密码子环中的三个核苷酸的序列,在蛋白质合成过程中通过碱基配对,识别且结合到mRNA的特殊密码上。(polysome):mRNA同时和若干个核糖体结合形成的念珠状结构,称为多核糖体。(二)?它们具有什么功能?①mRNA:蛋白质合成的模板;②tRNA:蛋白质合成的氨基酸运载工具;③核糖体:蛋白质合成的场所;④辅助因子:(a)起始因子—--参和蛋白质合成起始复合物形成;(b)延长因子—--肽链的延伸作用;(c)释放因子壹--终止肽链合成且从核糖体上释放出来。:..?提示:三个突破性工作(1)体外翻译系统的建立;(2)核糖体结合技术;(3)核酸的人工合成。?(1)密码无标点:从起始密码始到终止密码止,需连续阅读,不可中断。增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。(2)密码不重叠:组成壹个密码的三个核苷酸只代表壹个氨基酸,只使用壹次,不重叠使用。(3)密码的简且性:在密码子表中,除Met、Trp各对应壹个密码外,其余氨基酸均有俩个之上的密码,对保持生物遗传的稳定性具有重要意义。(4)变偶假说:密码的专壹性主要由头俩位碱基决定,第三位碱基重要性不大,因此在和反密码子的相互作用中具有壹定的灵活性。(5)通用性及例外:地球上的壹切生物都使用同壹套遗传密码,但近年来已发现某些个别例外现象,如某些哺乳动物线粒体中的UGA不是终止密码而是色氨酸密码子。(6)起始密码子AUG,同时也代表Met,终止密码子UAA、UAG、UGA使用频率不同。。(1)mRNA:DNA的遗传信息通过转录作用传递给mRNA,mRNA作为蛋白质合成模板,传递遗传信息,指导蛋白质合成。(2)tRNA:蛋白质合成中氨基酸运载工具,tRNA的反密码子和mRNA上的密码子相互作用,使分子中的遗传信息转换成蛋白质的氨基酸顺序是遗传信息的转换器。(3)rRNA核糖体的组分,在形成核糖体的结构和功能上起重要作用,它和核糖体中蛋白质以及其它辅助因子壹起提供了翻译过程所需的全部酶活性。。(1)二位点模型A位:氨酰-tRNA进入且结合的部位;P位:起始氨酰-tRNA或正在延伸的:..肽基-tRNA结合部位,也是无载的tRNA从核糖体上离开的部位。(2)三位点模型大肠杆菌上的70S核糖体上除A位和P位外,仍存在第三个结合tRNA的位点,称为E位,它特异地结合无负载的tRNA及无负载的tRNA最后从核糖体上离开的位点。?催化氨基酸活化的酶称氨酰-tRNA合成酶,形成氨酰-tRNA,反应分俩步进行:(1)活化需Mg2+和Mn2+,由ATP供能,由合成酶催化,生成氨基酸-AMP-酶复合物。,(2)转移在合成酶催化下将氨基酸从氨基酸—AMP—酶复合物上转移到相应的tRNA上,形成氨酰-tRNA。。蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例:(1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参和蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。(2)肽链合成的起始:由起始因子参和,mRNA和30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能量。(3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化和P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,’→3’方向移动壹个密码子距离,A位上的延长壹个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供。(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时,终止因子RF-1、RF-2识别终止密码,且使肽酰转移酶活性转为水解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链,合成终止。?:..提示:(1)氨基酸和tRNA的专壹结合,保证了tRNA携带正确的氨基酸;(2)携带氨基酸的tRNA对mRNA的识别,mRNA上的密码子和tRNA上的反密码子的相互识别,保证了遗传信息准确无误地转译;(3)起始因子及延长因子的作用,起始因子保证了只有起始氨酰-tRNA能进入核糖体P位和起始密码子结合,延伸因子的高度专壹性,保证了起始tRNA携带的fMet不进入肽链内部;(4)核糖体三位点模型的E位和A位的相互影响,能够防止不正确的氨酰-tRNA进入A位,从而提高翻译的正确性;(5)校正作用:氨酰-tRNA合成酶和tRNA的校正作用;对占据核糖体A位的氨酰-tRNA的校对;变异校对即基因内校对和基因间校对等多种校正作用能够保证翻译的正确。。(1)起始因子不同:原核为IF-1,IF-2,IF-2,真核起始因子达十几种。(2)起始氨酰-tRNA不同:原核为fMet-tRNAf,真核Met-tRNAi(3)核糖体不同:原核为70S核粒体,可分为30S和50S俩种亚基,真核为80S核糖体,?提示:(1)水解修饰;(2)肽键中氨基酸残基侧链的修饰;(3)二硫键的形成;(4)辅基的连接及亚基的聚合。?提示:蛋白质的高级结构是由氨基酸的顺序决定的,不同的蛋白质有不同的氨基酸顺序,各自按壹定的方式折叠而成该蛋白质的高级结构。折叠是在自然条件下自发进行的,在生理条件下,它是热力学上最稳定的形式,同时离不开环境因素对它的影响。对于具有四级结构的蛋白质,其亚基能够由壹个基因编码的相同肽链组成,也能够由不同肽链组成,不同肽链能够通过壹条肽链加工剪切形成,或由几个不同单顺反子mRNA翻译,或由多顺反子mRNA:..翻译合成。?如何证明核糖体是蛋白质的合成场所?原核细胞:70S核糖体由30S和50S俩个亚基组成;真核细胞:80S核糖体由40S和60S俩个亚基组成。利用放射性同位素标记法,通过核糖体的分离证明之。,将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后,进行指纹图分析。结果发现只有壹个肽段的差异,测得其基酸顺序如下:正常肽段Met-Val-Cys-Val-Arg突变体肽段Met-Ala-Met-Arg(1)什么核苷酸插入到什么地方导致了氨基酸顺序的改变?(2):有关氨基酸的简且密码分别为Val:GUUGUCGUAGUGArg:GACGAGAAGGCys:UGUUGCAla:GCACGC提示:(1)在正常肽段的第壹个Val的密码GUA的G后插入了壹个C;(2)正常肽段的核苷酸序列为:AUGGUAUGCGU…CG…;突变体肽段的核苷酸序列为:AUGGCUAUGCGU。。核酸(Nucleicacids)蛋白质(Proteins)DNARNA壹级结构核苷酸序列氨基酸排列顺序PrimarystructureAGTTCT或AGUUCU的排列顺序肽键:..3,,5,-磷酸二酯键二级结构双螺旋配对(茎-环结构)有规则重复的构象Secondarystructure主要是氢键,碱基(同左)(α-helix,β-堆积力sheet,β-turn)氢键三级结构超螺旋RNA空间构象壹条肽链的空间构Tertiarystructure象范德华力氢键疏水作用盐桥二硫键等四级结构多条肽链Quaternarystructure(或不同蛋白)。原核生物和真核生物的翻译比较如下:仅述真核生物的,原核生物和此相反。(1).起始Met不需甲酰化;(2).无SD序列,但需要壹个扫描过程;(3).tRNA先于mRNA和核糖体小亚基结合;(4).起始因子比较多;(5).只壹个终止释放因子。(三),以__氨酰-tRNA__为原料直接供体,以__核糖体_____为合成杨所。,其中____61___个为氨基酸编码,起始密码子为___AUG______;终止密码子为___UAA_、___UAG_、__UGA___。,真核生物的起始tRNA以____tRNAi___:..表示,延伸中的甲硫氨酰tRNA以___tRNAm__表示。、____线粒体____和____叶绿体_______三种细胞器内进行。,Tu为对热___不稳定___蛋白质,Ts为对热__稳定_蛋白质。,其中RF-1识别终止密码子_____UAA________、____UAG________;RF-2识别_____UAA_____、_____UGA_______;真核中的释放因子只有____RF_______壹种。-tRNA合成酶对___氨基酸_______和相应的__tRNA______有高度的选择性。,起始氨酰-tRNA是___甲酰甲硫氨酰-tRNA___。。,但在合成起始时仍需多消耗____1____个高能磷酸键。-tRNA______的水解。,__终止因子_________进人“A”位,识别出___终止密码子______,同时终止因子使__肽基转移酶______的催化作用转变为___水解作用_________。,真核生物核糖体由___40S______小亚基和_______60S________大亚基组成。、____Thr_______、___Tyr_______。:..(四)(④)。①从C→N端②定点双向进行③从N端、C端同时进行④从N→(③)。①线粒体②叶绿体③高尔基体④(④)。①EF—Tu②EF壹2③EF--G④(①)。①RF②RF壹1③RF壹2④(④)。①A、G②C、U③U④U、C、(③)。①ATP②GTP③ATP、GTP④(②)。①将壹个氨基酸连接到另壹个氨基酸上②把氨基酸带到mRNA位置上③将mRNA接到核糖体上④,叙述正确的是(③)。①空载tRNA的脱落发生在“A”位上②核糖体沿mRNA的3’→5’方向相对移动③核糖体沿mRNA的5’→3’方向相对移动④,下列哪壹步不需要消耗高能磷酸键(①)。①肽基转移酶形成肽键②氨酰壹tRNA和核糖体的“A,’位点结合:..③核糖体沿mRNA移动④fMet—tRNAf和mRNA的起始密码子结合以及和大、(④)。①已达到mRNA分子的尽头②具有特异的tRNA识别终止密码子③终止密码子本身具有酯酶作用,可水解肽酰和tRNA之是的酯键④终止密码子被终止因子(RF)(①④⑤)。①UAA②UAU③UAC④UAG⑤,当tRNA反密码子第1位碱基是I时,能够识别哪几种密码子(①②⑤)①A②C③G④T⑤(③④⑤)。①IF1②IF2③eIF2④eIF4⑤(①②③⑤)。①氨基酸必须活化②需要消耗能量③每延长壹个氨基酸必须经过进位、转肽、移位、税落四个步骤④合成肽链由C端向N端不断延长⑤、修饰(②③④⑤)。①切除内含子,连接外显子②切除信号肽③切除N-端Met④形成二硫键⑤,下列哪些步骤需要消耗能量(①②③⑤)。①氨基酸分子的活化②70S起始复合物的形成③氨酰tRNA进入核糖体A位④肽键形成⑤(①②③⑤)。

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