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大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告.docx
文档分类:
医学/心理学
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大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告.docx
该【大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告 】是由【niuwk】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告一、研究目的本研究旨在构建大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白并表达其纯化,为后续研究提供基础材料。二、(DE3)菌株pET28a-EAP-SA质粒IPTGNi-)构建pET28a-EAP-SA质粒将链亲和素(SA)基因插入到pET28a-EAP质粒的多克隆位点中,得到pET28a-EAP-SA质粒。2)转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株将pET28a-EAP-SA质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,并筛选出阳性菌株进行后续实验。3)IPTG诱导表达将阳性菌株接种到含有IPTG的LB培养基中,诱导表达融合蛋白。4)蛋白纯化采用Ni-NTA纯化柱纯化表达的融合蛋白,并进行SDS-PAGE电泳检测。三、实验结果1)构建pET28a-EAP-SA质粒成功,并通过双酶切验证。2)将pET28a-EAP-SA质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,并选取阳性菌株进行后续实验。3)IPTG诱导表达融合蛋白,通过SDS-PAGE电泳检测,发现目标蛋白表达成功。4)融合蛋白采用Ni-NTA纯化柱进行纯化,并在SDS-PAGE电泳图中观察到目标蛋白的存在。四、结论与展望本研究成功构建了pET28a-EAP-SA质粒并表达纯化了融合蛋白。目前已经完成中期实验,后续将继续进行蛋白酶切、Westernblot和活性检测等实验,以验证目标融合蛋白的功能和应用。
大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)-链亲和素(SA)融合蛋白的构建与表达的中期报告 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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