下载此文档

【2024西南大学生物学考研】 分子生物学简答题梳理.pdf


文档分类:研究生考试 | 页数:约7页 举报非法文档有奖
1/7
下载提示
  • 1.该资料是网友上传的,本站提供全文预览,预览什么样,下载就什么样。
  • 2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
  • 3.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
1/7 下载此文档
文档列表 文档介绍
该【【2024西南大学生物学考研】 分子生物学简答题梳理 】是由【小屁孩】上传分享,文档一共【7】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【【2024西南大学生物学考研】 分子生物学简答题梳理 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。【2024西南大学生物学考研】分子生物学简答题梳理一、细胞内RNA的生物学功能?细胞内RNA具有多种生物学功能,不仅仅是作为蛋白质合成的中间产物。下面是一些细胞内RNA的主要生物学功能::细胞内RNA可以通过多种机制参与基因的转录调控。例如,小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA)参与剪接和修饰转录后RNA的过程,长非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miRNA)则可以通过与DNA、RNA或蛋白质相互作用,调控基因的表达水平。:mRNA是编码蛋白质的模板,它通过转录和剪接过程生成,并被翻译为蛋白质。rRNA和tRNA则是蛋白质合成的重要组成部分,它们在核糖体中发挥着关键的作用。:miRNA和siRNA是一类小分子RNA,在RNA干扰过程中起着重要的作用。它们可以通过与靶标mRNA结合,导致mRNA的降解或翻译抑制,从而调控基因表达。:在免疫系统中,一些细胞内RNA可以作为信号分子,调控免疫应答的过程。例如,某些lncRNA和miRNA可以调控免疫相关基因的表达,影响免疫细胞的分化和功能。:一些细胞内RNA参与调控细胞周期的进程。例如,某些miRNA可以调控细胞周期蛋白的表达,影响细胞的增殖和分裂。:一些细胞内RNA可以作为信号分子,在细胞信号传导通路中发挥作用。例如,lncRNA和miRNA可以通过与蛋白质相互作用,调节细胞信号通路的活性和效应。除了上述功能外,细胞内RNA还参与其他生物学过程,如DNA修复、染色质结构调控、细胞分化和发育等。随着对细胞内RNA的研究的深入,我们对其功能和机制的理解也在不断扩展和深化。二、中心法则的内容?中心法则(CentralDogma)是描述生物信息传递的基本原理,它概括了DNA转录为RNA,再由RNA翻译为蛋白质的过程。中心法则的具体内容如下:(Replication):在细胞有丝分裂或无丝分裂的过程中,DNA通过复制过程进行复制。DNA的两条链被解开,每条链作为模板,合成新的互补链,形成两个完全相同的DNA分子。这样,每个新细胞都会获得与母细胞相同的基因信息。(Transcription):在细胞核中,DNA的一部分被转录成RNA分子。转录过程中,DNA的双链解开,其中一条链作为模板,合成与DNA序列互补的RNA分子。这个过程由酶类似于RNA聚合酶(RNApolymerase)完成。转录生成的RNA称为转录本(transcript)或mRNA(messengerRNA)。(Translation):转录生成的mRNA离开细胞核,进入细胞质中的核糖体(ribosome)。在核糖体的作用下,mRNA被翻译成蛋白质。翻译过程中,mRNA的核苷酸序列被读取,每三个核苷酸称为一个密码子(codon),对应一个特定的氨基酸。tRNA(transferRNA)分子带有特定的氨基酸,通过与mRNA的密码子互补配对,将氨基酸连接起来,形成多肽链,最终折叠成功能性的蛋白质。总结起来,中心法则描述了生物信息的传递过程:DNA通过复制生成新的DNA分子,通过转录生成RNA分子,再通过翻译将RNA翻译成蛋白质。这个过程是生物体遗传信息传递和表达的基础,对维持生命的正常功能至关重要。然而,值得注意的是,中心法则并不是一个完整的描述,因为在某些情况下,RNA还可以逆转录为DNA(逆转录过程)或直接参与功能活动而不经过蛋白质的翻译。生物化学中分子生物学简答题一、蛋白互作技术有哪些?(1)酵母双杂原理很多真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域,即DNA特异结合域(DNA-bindingdomain,BD)与转录激活域(Transcriptionalactivationdomain,AD)。这两个结构域各具功能,互不影响,但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域,否则无法完成激活功能。将两待测研究蛋白(蛋白X与蛋白Y)分别与BD、AD结构域构建融合质粒。将构建好的两个质粒转入同一酵母细胞中表达,如果两蛋白之间不存在相互作用,则下游基因(报告基因)不会转录表达;如果两个蛋白存在相互作用,则BD与AD两结构域空间上很接近,从而下游基因(报告基因)得到转录。判断通过报告基因表达与否,即可判断两蛋白之间是否存在相互作用。用酵母双杂交系统能够快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,并能寻找、分离与已知蛋白相互作用的配体,在研究抗原和抗体相互作用、发现新的蛋白质和发现蛋白质的新功能、筛选药物作用位点及药物对蛋白互作影响、建立基因组蛋白连锁图等方面应用广泛。(2)免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究两个蛋白相互作用的经典方法。原理:基于抗体与抗原(靶蛋白)之间的特异性结合,此时如果样品溶液中存在能与靶蛋白相互作用的目的蛋白,会一同被拉下来,随后利用SDS-PAGE,WesternBlot等方法对得到的目标蛋白进行分析,进而证明两者间的相互作用。通俗点来说,假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用,首先我们通过合适的方法处理样本,将蛋白提取出来(同时不能破坏蛋白之间的相互作用),然后用预先结合了琼脂糖珠或者磁珠的A蛋白抗体捕获样本中的A蛋白,那么与A蛋白结合的B蛋白也能一起沉淀下来。再将蛋白从珠子上裂解下来,对B蛋白进行检测,能检测到,说明B蛋白在之前的沉淀过程中随着A蛋白一起被拉下来了,进而证明二者之间存在相互关系。(3)Pull-down实验,又称拉下实验,是一种体外亲和纯化技术。(这个实验跟免疫共沉淀实验很像,不同的是免疫共沉淀是在细胞里进行的。)原理:将一种蛋白质固定于某种基质上(如Sepharose),但细胞抽提液经过该基质时,可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附,而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或洗脱条件而回收下来。为了更有效地利用pulldown技术,可以将待纯化的蛋白以融合蛋白的形式表达,即将“诱饵”蛋白与一种易于纯化的配体蛋白相融合。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合标签从细菌中一步纯化出GST融合蛋白。GSTPull-Down实验:利用DNA重组技术将已知蛋白与GST融合,而融合蛋白通过GST与固化在载体上的GTH(谷胱甘肽)亲和结合。简单来说,我们假定a蛋白和b蛋白可能存在互作,将纯化的融合GST的a蛋白和纯化的b蛋白以及能特异性结合GST的Sephrose4Bbeads混合在一起孵育一定时间,然后洗去未结合的蛋白,煮沸beads进行SDS-PAGE电泳。通过Westernblot检测结果,我们可以看到GST-a蛋白和b蛋白所对应的条带,即表明了a蛋白和b蛋白因发生相互作用而被GST-apulldown(GST对照只显示一个条带)。二、基因编辑技术的原理,应用和进展?基因编辑技术是一组用于修改生物体基因组的技术,其中最具代表性的是CRISPR-Cas9系统。下面是基因编辑技术的原理、应用和进展的概述:原理:基因编辑技术的核心原理是通过引入特定的DNA修饰或改变基因组中的DNA序列,从而实现对目标基因的修改。CRISPR-Cas9是一种常用的基因编辑工具,它利用CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)序列和Cas9(CRISPR-associatedprotein9)蛋白质来实现基因组的精确编辑。CRISPR序列可以通过设计特定的引导RNA(gRNA)来指导Cas9蛋白质与目标DNA序列结合,并引发DNA双链断裂。随后,细胞的自我修复机制(如非同源末端连接或同源重组)可以被利用来插入、删除或修改目标基因。应用:基因编辑技术具有广泛的应用,包括但不限于以下几个方面::通过基因编辑技术,可以生成基因敲除、基因敲入或基因突变的模型生物,帮助研究人员理解基因的功能和调控机制。:基因编辑技术可以用于研究遗传疾病的发生机制和治疗方法。例如,可以通过模拟人类遗传疾病的基因突变,研究疾病的发展过程,并开发针对性的治疗方法。:基因编辑技术可以用于改良农作物和畜牧业生物的性状,提高产量、抗病性和适应性等。:基因编辑技术为药物研发提供了新的途径。可以通过基因编辑来改变细胞的代谢途径、增强药物的生产能力,或者直接编辑人体细胞以治疗疾病。进展:基因编辑技术在过去几年取得了重大的进展,CRISPR-Cas9系统的使用使得基因编辑更加简单、高效和精确。以下是一些基因编辑技术的进展:-Cas9的改进:研究人员对CRISPR-Cas9系统进行了改进,以提高其特异性和准确性,减少非特定性的剪切。例如,通过使用改进的Cas9变体或优化gRNA设计,可以降低剪切位点的离靶效应。:除了CRISPR-Cas9,还出现了其他基因编辑工具,如CRISPR-Cas12、CRISPR-Cas13和基于转座子的系统等。这些工具在特定应用场景下具有独特的优势,拓宽了基因编辑技术的应用范围。:研究人员致力于实现更精确的基因组编辑,包括单碱基编辑、基因组大片段的插入和删除等。这些技术的发展使得基因编辑更加精细和可控。:基因编辑技术在基因治疗和个体化医学领域具有巨大的潜力。临床试验已经开始使用基因编辑技术治疗一些遗传性疾病,如β-地中海贫血和猎光病等。总结起来,基因编辑技术通过CRISPR-Cas9等工具的发展,为研究人员提供了一种高效、精确和灵活的基因组编辑工具。它在基础研究、医学研究和农业改良等领域具有广泛的应用前景,并且不断取得新的进展。分子生物学在普通生物学和生物化学中的重要性分子生物学在普通生物学中具有重要的地位和作用。分子生物学是研究生物体内分子结构、功能和相互作用的学科,通过揭示生物体内分子水平的机制和过程,为我们理解生命的基本原理和生物系统的功能提供了关键的洞察力。分子生物学在普通生物学中扮演着重要的角色,它为我们揭示了生命的分子机制和生物系统的功能,推动了许多领域的研究和应用。通过深入研究分子水平的生物学过程,我们可以更好地理解和操纵生命的奥秘。

【2024西南大学生物学考研】 分子生物学简答题梳理 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.