一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法.docx

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ISSl基因聚合效应对产羔数的影响,为集成创新山羊产羔性状的多基因聚合育种技术体系提供试验依据和理论依据。[0008]为了实现上述任务,本发明采取如下的技术解决方案:[0009]一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法,其特征在于,以山羊基因组DNA为模板,在PCR条件下,利用3对引物P1、P2和P3,分别扩增干细胞因子(SCF)基因的3’非翻译区,III型跨膜酪氨酸激酶受体(KIT)基因外显子7和亲吻素(KISSl)基因内含子1,其中:[0010]所述的引物Pl如下:[0011]上游引物IF:5’--3’;[0012]下游引物IR:5’-AG-3’;[0013]所述的引物P2如下:[0014]上游引物2F:5’-ACAGGT-3’;[0015]下游引物2R:5’-TGGTCAGCGAATTGTAGG-3’;[0016]所述的引物P3如下:[0017]上游引物3F:5’-CCCGCTGTAACTAGAGAAAG-3’;[0018]下游引物3R:5’-AGGGTGAGTGATACT-3’;[0019]引物Pl扩增干细胞因子(SCF)基因的3’非翻译区,用于筛查山羊干细胞因子(SCF)基因的3’非翻译区位点的突变;[0020]引物P2扩增III型跨膜酪氨酸激酶受体(KIT)基因外显子7,用于筛查山羊III型跨膜酪氨酸激酶受体(KIT)基因外显子7位点的突变;[0021]引物P3扩增亲吻素(KISSl)基因的内含子1,用于筛查山羊亲吻素(KISSl)基因的内含子I位点的突变;[0022]根据琼脂糖凝胶(%)电泳对3对引物扩增产物进行大小判定,然后采用DNA测序技术筛查到干细胞因子(SCF)基因的3’非翻译区,III型跨膜酪氨酸激酶受体(KIT)基因外显子7和亲吻素(KISSl)基因的内含子I共有3个碱基的突变。[0023]再利用浓度为10%的聚丙烯酰***%的琼脂糖凝胶电泳对这3个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析,分析不同基因型组合与山羊产羔数之间的关系,挑选最佳的基因型组合,分析拥有最佳基因型组合个体的选配方式,应用这些选配方式形成山羊多羔的多基因聚合良种核心群。[0024]所述的PCR扩增的条件是:[0025]15μL反应体系:包括DNA模板50ng,,上下游引物(10μΜ),加灭菌水至15μI;[0026]PCR反应程序如下: