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分子生物学实验.ppt

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文档列表 文档介绍

分子生物学实验
课程编号: 04010107
课程名称: 分子生物学实验技术
学分/学时:
课程层次: 专业必修课
修读类型: 必修
考核方式: 实验报告、笔试
开课学期: 第6学期
适用专业: 生物技术专业
目录
实验一、植物染色体DNA的提取及纯度鉴定
实验二、大肠杆菌质粒DNA的提取
实验三、琼脂糖凝胶电泳
实验四、DNA的限制性酶切
实验五、大肠杆菌感受态细胞的制备及外源DNA的转化
实验六、PCR基因扩增技术
实验一、植物染色体DNA的提取及纯度鉴定
一、实验目的
掌握真核植物基因组染色体DNA的一种提取方法
学****使用紫外分光光度法鉴定DNA的纯度,估计相对含量。
二、实验原理
用低温机械研磨和高浓度、SDS等破坏细胞壁及膜,使蛋白变性使DNA与蛋白分离,用一定浓度的溶液将DNA提取出来,用高浓度乙醇沉淀DNA,***仿/异戊醇等去除杂质,RN ase降解核酸,得到纯度较高的DNA样品。根据核酸与蛋白质分别在OD260和OD280有吸收峰分别测定之,比较OD260/,依据经验公式计算DNA含量。
三、实验材料与试剂物品

香椿(Toona sinensis)黄花苗
2、试剂
提取缓冲液(预冷)
SSC
RNase液
3、仪器设备
高速冷冻离心机(8-316)
制冰机(8-312)
紫外可见分光计(8-316)
冰箱(-86度在8-312,-20度,4度在8-312)
水浴锅
电子天平
玻璃仪器等
四、实验操作流程
采摘芽苗,洗净→剪小段,擦干表面水分→放-86度冰箱冻30分钟以上→冰浴研磨匀浆(分次加提取液)→以下见讲义
五、结果与处理
纯度
含量

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