5.酶工程 - 西安理工大学理学院.ppt

酶工程
酶
定义:一种生物催化剂,具有作用专一性强、催化效率高等特点,能在常温常压和低浓度条件下进行复杂的生化反应。包括核酶及蛋白质酶。
酶工程
酶工程
酶工程
定义利用酶的特异催化功能,将一种物质转化为另一种物质的技术.
优良产酶菌种的筛选
基本步骤
采样菌种分离产酶性能测定复筛
酶工程
基因工程菌的构建
酶工程
产生目的酶的生物
酶的纯化
总mRNA的纯化
cDNA
测定部分氨基酸序列
mRNA
合成寡核苷酸探针
克隆到Ecoli中,建立cDNA文库
转入工业生产用宿主(工程菌)
鉴定cDNA克隆子
酶的工业化生产
定义在人工控制的条件下,有目的地利用微生物培养来生产所需的酶。
包括
培养基的选择
发酵方式的选择
发酵条件的控制管理
酶工程
微生物酶的发酵生产
碳源淀粉、糖蜜、蔗糖等。
氮源有机氮(豆饼粉、花生饼粉)、无
机氮
无机盐类低浓度有利于酶产量的提高,
有些金属离子是酶的组分。
生长因子细胞生长必需的微量有机物,如维生素、氨基酸、嘌呤碱、嘧啶碱。
pH值应根据微生物的需要调节pH值。
培养基
酶工程
固体发酵用于真菌的酶生产。方法简单,但操作条件不易控制。
液体深层发酵关键是对温度、通气、搅拌和pH的控制。产品回收和提纯工艺简便。
酶的发酵生产方式
酶工程
添加诱导物分为①酶的作用底物;②酶的反应产物;③酶底物类似物。
降低阻遏物浓度措施:分次添加碳源、产物类似物可解除反馈阻遏。
表面活性剂肥离子型表面活性剂常被用作产酶促进剂。
提高酶产量的措施
酶工程
工业用酶一般无需高度纯化,如洗涤用蛋白酶。
食品工业用酶需适当的分离纯化,以确保安全卫生。
医药用酶需经过高度纯化,不能含有热源物质。
酶工程
酶的分离纯化