课题1微生物的实验室培养.ppt

专题2 微生物的培养与应用
一、微生物的实验室培养
(一)培养基
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配置出供其生长繁殖的营养基质称
培养基
一般的培养基均需要碳源、氮源、无机盐和水等(具体见教材15页“1000mL牛肉蛋白胨培养基的营养构成”)。
培养基的基本成分
液体培养基(一般用锥形瓶盛装)
固体培养基(一般用试管或培养皿盛装),在液体培养基的基础上再添加琼脂。
培养基的种类
(二)无菌技术
无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法技术。
获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。
消毒
无菌技术的种类
灭菌
使用较为温和的方法(酒精、紫外线)来杀死部分对人体有害的微生物。
对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒;
将培养皿、接种用具进行灭菌;
接种的过程要在酒精灯附近进行。
使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物(包括芽孢和孢子)。
芽孢
有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.
菌落
细菌的菌落特征因种而异
常用的消毒与灭菌的方法
※消毒的方法
1. 煮沸消毒法: 100℃煮沸5-6min
2. 巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或
80 ℃下煮15min
3. 化学药剂消毒法: 用75%酒精进行皮肤消毒;
***气消毒水源
4. 紫外线消毒
:接种用具和接种过程中的试管口或瓶口放在酒精灯火焰的充分燃烧层中进行灼烧灭菌(如教材16页图2-2所示)。
※灭菌的方法
:将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内,在160~170OC中加热1~2h即可。
:将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅内(见教材16页图2-4)煮沸,待冷空气排尽后,密闭继续加热至锅内压力到100kPa,温度到121OC后,维持15~30min即可。
二、实验操作
(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
(计算)
物质
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
水
重量
5g
10g
5g
20g
定溶至1000mL

按比例称取各种物质,注意事项:牛肉膏要放在称量纸上称量,牛肉膏、蛋白胨都易吸潮,称取时动作要迅速,称后及时盖上瓶盖。