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实验三十 氧化亚铁硫杆菌的生理研究.doc


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实验三十  氧化亚铁硫杆菌的生理研究
一、目的要求
    ()的特性;
    ;
    。
二、实验原理
    氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans,)是一种革兰氏阴性菌,具有化能自养、好气、嗜酸、适于中温环境等特性,广泛存在于酸性矿山水及含铁或硫的酸性环境中。
    像光合作用一样,;。
    通过氧化磷酸化作用,(液相游离态或结晶状态)获得电子,将2价铁氧化为3价铁离子,所得电子经一系列传递过程合成能量货币ATP,最后将电子传递给O2。宏观反应可表示为
2H++2Fe2 ++1/202        2Fe3++H20
    ,人们利用这一现象已开始应用于矿业冶金,并提出了细菌浸出的直接间接作用机理。直接作用指附着细菌直接催化矿物氧化分解,从中直接得到能源和其它矿质营养元素。间接作用指依靠细菌的代谢产物——硫酸亚铁的氧化作用,细菌间接地从矿物中获得生长所需的能源和基质。具体来说,直接作用和间接作用发生如下化学反应:
    直接作用:
MS+2O2 ——→M2++SO42-
间接作用:
4Fe2++4H++O2 ——→ 4Fe3++2H2O
           MS+2Fe3+——→M2++2Fe2++S0
2S0+3O2+2H2O——→2H2SO4
    。酸性环境中无催化剂条件下,空气氧化Fe2+进行的很慢。-106倍。
    亚铁滴定测定法:亚铁测定用***钾标准滴定法,样品用量2ml,移入20ml的硫磷酰强酸性溶液中,然后用 /L的***钾溶液进行滴定,也可视样品中亚铁浓度将滴定药剂进行稀释后再行滴定,前者滴定1ml即相当于含有亚铁 ,后者则再除以稀释倍数;%的二苯***硫酸钠,当变为紫色时即为终点;硫磷酰配比为浓硫酸150ml:150ml浓磷酸:700ml蒸馏水。
    pH的测定:用pH计。
三、菌种及仪器
    菌种:氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)
    主要仪器:烧杯(1000ml、500ml)、三角瓶(若干)、药匙、电子天平、玻璃棒、电炉、PH试纸、2ml移液管、摇床、洗瓶、酸性滴定管、小烧杯(10ml)血细胞计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细滴管。
    实验药品及试剂:(NH4)2SO4、KCl、K2HPO4 、MgSO4·7H2O、Ca(NO3)2 、1:1H2SO4 溶液、蒸馏水、FeSO4·7H2O 、硫磷酰强酸性溶液(强硫酸150ml+强磷酸150ml+蒸馏水700ml)、 /L的***钾溶液、%的二苯***硫酸钠。  
四、实验步骤:
    :
    (NH4)(g/L)、(g/L)、(g/L)、MgSO4·(g/L

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