3节 食品检验分析方法4.4节 液相色谱..ppt

一、概述:
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化操作。
高效液相色谱法是继气相色谱之后,70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术.

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1、无本质区别
经典液相色谱
现代液相色谱
流动相
在常压下输送
高压输送(×107Pa)
固定相
柱效低
柱效高(特殊方法用小粒径填料填充)
分析周期
长
短
检测器
无
高灵敏度
自动化
无
是
高效液相色谱法(高速液相色谱法、高压液相色谱法)
仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自化操作。
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高效液相色谱
经典色谱
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2、高效液相色谱具有以下特点*(与气相色谱比较)
特点
现代液相色谱
气相色谱
目标物
(1) 能测高沸点有机物和无机离子
被测物需气化;在500℃以下工作;难分析M>400的有机物
温度
(2) 色谱柱一般可室温工作
精度很高的恒温室或程序升温室
柱效
(3) 柱效高于气相色谱
(柱长一般为50cm左右)
相色谱柱效为2000塔板/m
速度
(4) 分析速度与气相相似
一般1-l0mL/min(几分钟-几十分钟)
柱压
(5) 柱压高于气相色谱(进口压力为150~300kg/cm2)
气源压力最高120kg/cm2,色谱柱压力2kg/cm2,爆炸危险。
灵敏度
(6) 灵敏度与气相色谱相似
高灵敏度检测器
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二、高效液相色谱仪
流程:
分析前,选择适当的色谱柱和流动相;
开泵,冲洗柱子,待柱子达到平衡且基线平直后;
用微量注射器把样品注入进样口,流动相把试样带入色谱柱进行分离,分离后的组分依次流入检测器的流通池,最后和洗脱液一起排入流出物收集器。
当有样品组分流过流通池时,检测器把组分浓度转变成电信号,经过放大,用记录器记录下来就得到色谱图。
色谱图是定性、定量和评价柱效高低的依据。
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1、
2、
3、
4、
5、
6、
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手执控制器
检测器
柱温箱
自动进样器
泵
脱气机
溶剂柜
记录系统
高压输液系统
进样系统
分离系统
检测系统
高效液相色谱仪
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高压输液系统,进样系统,分离系统和检测系统
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1、高压输液泵
高压输液泵要求:
流量恒定、无脉动、有较大的调节范围;
能抗溶剂的腐蚀;
有较高的输出压力;
泵的死体积要小,便于更换溶剂和梯度洗提。
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