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蛋白质纯化技术 - Lite.ppt

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文档列表 文档介绍

蛋白质的分离纯化与鉴定Isolation, Purification and Identification of Protein
分子生物学圣经—分子克隆实验指南
为什么要纯化蛋白质?
理论意义:深入研究某种蛋白质的功能以及作用机制,如信号通路中的蛋白质…
应用价值---蛋白质工程
医药、工业、科研…
作为药物靶点…
蛋白质是生命功能的执行者
蛋白质工程中进行蛋白质纯化的必要性
首先,需要单一的蛋白质作为实验材料,研究其结构与功能;
其次,对蛋白质进行修饰改造时需要单一的蛋白质作为原材料;
最后,为了生产性能更优良的蛋白质,需要对设计改造过的蛋白质进行大量纯化,从而开发出相关产品。
本章概要
蛋白质纯化方法
蛋白质纯化原则
纯化步骤
蛋白质的鉴定

①分子大小
②分子形状
③带电特性
④溶解特性
⑤与配体特异性结合不同
⑥吸附性质
⑦变性和复性

蛋白质分子大小主要取决于:
蛋白质肽链的数目
每条肽链的氨基酸残基数目。
几百~百万 Da
常用方法
透析
超滤
凝胶过滤
离心
透析(dialysis)
利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

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