第二章基因工程工具酶
基因工程操作中经常用到的酶
重组DNA技术中常用工具酶
酶
功能
限制性核酸内切酶
识别特异序列,切割DNA
DNA连接酶
催化DNA中相邻的5’磷酸基和3’羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接
DNA聚合酶Ⅰ
1)合成双链cDNA的第二条链;2)缺口平移制作高比活探针 3)DNA序列分析 4)填补3’末端
反转录酶
1)合成cDNA 2)替代DNA聚合酶I进行填补、标记或DNA序列分析
多聚核苷酸激酶
催化多聚核苷酸5'羟基末端磷酸化、或标记探针
末端转移酶
在3’羟基末端进行同质多聚物加尾
碱性磷酸酶
切除末端磷酸基
第一节限制性核酸内切酶
一、限制性核酸内切酶
二、限制性内切酶的作用机制
OH
P
O
O
OH
O-
OH
三、限制性核酸内切酶的识别序列
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