胰腺癌组织中神经生长因子受体的表达意义.doc

胰腺癌组织中神经生长因子受体的表达意义.doc胰腺癌组织中神经生长因子受体的表达意义
【摘要】目的: 研究神经生长因子(NGF)高亲和受体TrkA与低亲和受体p75在胰腺癌中的表达意义. 方法: 应用实时定量PCR法检测56例胰腺癌组织中TrkA及p75的表达并进行临床病理及预后分析. 结果: 所有组织标本中均可检测出TrkA及p75的表达呈负相关. p75与TrkA的表达水平与患者的腹背部疼痛和神经浸润程度有关(P均<). Cox单变量分析揭示,高p75表达患者较高TrkA患者的总生存时间延长(P<),Cox多变量分析揭示,p75及TrkA均为影响预后的独立因素. 结论: 胰腺癌中TrkA的表达促进肿瘤的恶性进展,而p75则相反,NGF刺激增长或抑制胰腺癌的双重作用可能与TrkA及p75的表达比率相关.
【关键词】胰腺肿瘤;受体,神经生长因子;TrkA;p75
0引言

胰腺癌嗜神经浸润的生物学特征,是导致术后局部复发影响预后的主要原因之一[1-2]. 研究发现,神经生长因子(nerve groo,出现远处转移48例. 所有患者术前按Zhu等[3]的方法结合视觉疼痛类比量表(visual analog scales, VAS)评分以评价患者腹部、背部疼痛水平:0,无疼痛;1,轻微可以忍受的疼痛;2,中等程度疼痛,需要非吗啡类止痛药物干预;3,严重的疼痛,需要吗啡类药物干预.
mg胰腺癌组织中抽提总RNA. 采用无RNA 酶的DNA酶Ⅰ处理,以提高RNA纯度,并使用Qiagen RNeasy Kit进一步纯化总RNA,操作方法按说明进行. 分光光度计测定总RNA的纯度,琼脂糖凝胶电泳初步评价总RNA质量, 确保总RNA的A260/~ 之间. 琼脂糖凝胶电泳, 18 s和28 s电泳条带清晰, 28 s和18 s亮度之比≥2. 实时定量PCR应用Primer premier ,参照各靶基因序列设计引物(表1),TBP(TATAboxbinding protEin)备用作管家基因. 每份标本取总RNA 5 μg,在逆转录酶SuperscriptⅡ( Invitrogen公司)作用下合成cDNA,加入引物1 μL,荧光染料SybrGreenI μL,总反应体积25 μL,按Invitrogen RTPCR kit操作说明应用ABI7700进行PCR扩增,反应条件: 50℃孵育2 min, 95℃ 10min, 45个循环, 95℃ 15s, 60℃ 1 min.
统计学处理: 软件包, 对年龄、性别、淋巴结转移、疼痛程度、肿瘤大小、神经浸润程度等可能影响中晚期胰腺癌预后的因素进行单因素和多因素分析. 两变量相关分析采用Spearman秩相关;两组间生存率曲线比较采用log
rank 法, 多因素分析采用Cox 比例风险回归模型, 率的比较采用χ2检验, 检验水平定为α=.

表1扩增靶基因的引物序列(略)
2结果
±(~),;p75 mRNA的浓度为0.