1、基因工程至少需要哪三种工具?
2、这三种工具分别起什么作用?
温故知新:
基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤?
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测与鉴定
问题1
一:目的基因的获取
如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、种子贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。
编码蛋白质的基因
什么是目的基因
?
获取目的基因的常用方法有哪些?
1、从基因文库获取目的基因
2、利用PCR技术扩增目的基因
3、人工合成目的基因
已知序列
未知序列
(一)从基因文库中获取目的基因
将含有某种生物不同基因的许多DN***断,导入到受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库
基因组文库
部分基因文库
(包含一种生物的所有基因)
(包含一种生物的一部分基因)
P13
基因组文库与部分基因文库的关系
怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢?
根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA、基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。
P13
提取某种生物的全部DNA
用适当的限制酶
一定大小的DN***段
将DN***段与载体连接
导入受体菌中储存
基因组文库
提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA
单链DNA
双链cDN***段
重组载体
与载体连接
cDNA文库
反(逆)转录酶
DNA 聚合酶
导入受体菌中储存
反转录法:
以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。
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