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酶对固定化底物的-课件（ppt·精·选）.ppt

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酶对固定化底物的作用
无机化学
张春丽
111102009
简介
如何用新的方法来监测酶对固定化底物的作用
酶的可接近性
酶的动力学,热力学性质
总结
二新方法来监测酶对固定化底物的作用
双光子显微镜
荧光显微镜
共焦拉曼显微镜
石英单晶微量天平
基质辅助激光解吸飞行时间质谱法
应用双光子显微镜的实例一
丹磺酰***(二甲氨基萘磺酰***)是一种强荧光剂,可用于测定肽链的氨基末端,它能专一地与链N-端α-氨基反应生成丹磺酰-肽,后者水解生成的丹磺酰-氨基酸具有很强的荧光
应用双光子显微镜的实例二
以香豆素为底物,在固相上发生酶促反应;
荧光基团它是双香豆素衍生物,含有羧基用来固定在玻璃的表面和给电子基团(酚类或苯***集团)作为与酶的结合部位。
酶识别头包含一个独特的化学结构,作为酶的结合部位,不同的靶酶可做微调。
应用微阵列技术(是一种将核酸序列纵横排列成序,样品在固相载体上以便核酸分子杂交,结合在芯片上的不同点),通过TMP观测其荧光强弱,来鉴别酶的种类、专一性及活性。
应用石英单晶微量天平的实例
石英晶体微天平实时监测固定底物的量。这种方法非常敏感对于测量质量的增加和减少,可精确到在纳克水平。
首先加入的是糖原磷酸化酶,它与固定在固相物上的支链淀粉结合,导致大规模的增加。
随后加入磷酸腺苷,激活磷酸酶,开始逐步
催化溶解的淀粉、使质量大量减少。

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