广西地方标准《三叶香茶菜组培苗生产技术规程》（征求意见稿).doc

B38
DB45
广西壮族自治区地方标准
DB45/T XXXX—2014
无公害中药材
三叶香茶菜组培苗生产技术规程
(本稿完成日期:2014-07-14)
2014-XX-XX发布
2014-XX-XX实施
广西壮族自治区质量技术监督局发布
目次
前言 II
1 范围 1
2 术语与定义 1
3 培育技术 1
4 种苗分级 4
5 包装、运输 4
6 生产档案 4
附录A(资料性附录) 培养基配方 5
前言
本标准按照GB/T —2009给出的规则起草。
本标准由广西壮族自治区卫生和计划委员会提出。
本标准由广西中药材标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:广西壮族自治区药用植物园
本标准主要起草人:闫志刚、胡东南、吴庆华、韦荣昌、刘凡、徐永莉。
三叶香茶菜组培苗生产技术规程
范围
本标准规定了唇形科植物牛尾草所属的三叶香茶菜(Rabdosia ternifolia () Hara)组培苗的术语和定义、快速繁育生产技术、包装、运输和生产档案。
本标准适用于广西境内三叶香茶菜组培苗的生产。
术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
外植体
由活植物体上切取下来进行离体培养的组织或器官。
组培苗
利用植物嫩茎或嫩芽等外植体,釆用植物组织培养技术生产的种苗。
继代苗
选取正常生长的初代无菌芽,调整培养基中生长素和细胞分裂素的比值,将植株进行切分后,快速诱导顶芽和腋芽的生长发育,繁殖出的用于扩繁的无根苗体。
脱毒苗
切取外植体茎尖≤ mm不带病毒的分生组织,组织培养繁殖成的无病毒完整小植株。
培育技术
组培瓶苗培育
外植体取材
取材前处理
晴天在种源基地,选择健壮、无病虫危害、性状稳定的健康植株,在采集前2 h喷雾灭菌。
取材
采集长3 cm~5 cm植株嫩茎,装入保鲜袋内编号标识并封口,放入4 ℃~10 ℃的低温保温容器密封带回组培室。
外植体消毒
消毒前处理
将外植体材料冲洗干净,在超净工作台中除去叶柄,剪切成2 cm~3 cm带腋芽或顶芽的茎段,分别放入消毒瓶中,每瓶材料不超过瓶子容积的1/3。
外植体消毒
在超净工作台中,将切好的材料放入75%的乙醇溶液中浸泡30 s后,用无菌水洗净,% HgCl2 溶液中7 min~9 min后,用无菌水冲洗5次~7次。
常规苗接种
在超净工作台中,将灭菌好的带腋芽茎段切成1 cm~2 cm,用镊子夹起斜植入瓶中的固体诱导培养基()上,腋芽朝上,茎段尽量与培养基表面接触,拧紧瓶盖。
脱毒苗接种
在超净工作台中,将灭菌好的带茎尖的茎段放在解剖镜上,用解剖刀进行剥离切取≤ mm茎尖放入的固体诱导培养基()上表面,拧紧瓶盖。
诱导培养
接种好的材料于暗室培养至外植体长出新芽,每天光照12 h~14 h;接种3 d~7 d后,清除被污染的芽体;待无菌芽长出3张以上叶片后,每天光照 8 h~10 h。培养温度白天保持22℃~26 ℃,夜间保持20 ℃~24 ℃。
继代培养
选取生长旺盛的无菌芽,剪成带腋芽或顶芽的茎段,转接入固体继代培养基()上,每天光照12 h~14 h,强度为2 00