第四章 酶学分析技术 PPT幻灯片.ppt

第四章 酶学分析技术_PPT幻灯片第四章酶学分析技术
酶是生物体内活细胞合成的具有高效、特异催化作功能的蛋白质。
什么是酶enzyme?
目前将生物催化剂分为两类:
蛋白质酶、核酶(脱氧核酶)
底物(substrate, S):被催化的物质。
产物(product, P):反应生成的物质。
酶促反应:酶催化的反应。
酶活力:酶所具有的催化能力。
几个有关名词
丙氨酸
谷氨酸
常见酶类
丙氨酸氨基转移酶ALT或GPT
乳酸脱氢酶(LDH)
天冬氨酸氨基转移酶(AST或GOT)
肌酸激酶(CK)
5′-核苷酸酶(5′-NT)
α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)
:
20世纪60年代以前根据酶活性测定方法建立者的姓氏命名的单位
ALP的金氏单位(King)
氨基移转酶的卡门氏单位(Karmen)
特点:各单位对温度、时间、物质量的定义不同,导致各测定值、参考范围相差很大,彼此间无法比较,现在临床应用较少。
卡门氏单位:℃,340nm,,,  10-4μmol NADH为一个卡门氏单位
举例:
金氏单位:100ml血清ALP在37℃与底物作用15min,产生1mg酚。
(µmol/min)
定义:在规定条件下(25℃及其他最适条件),每min催化1µmol
底物转变为产物的酶量,为1U,1U=1µmol/min。
,2001年
37℃

定义:1Katal是在规定条件下,每秒钟催化1mol底物转变为产物的
酶量。1Katal=1mol/s。
IU与Katal单位的关系:1katal = 60×106U,1U =
三、酶促反应动力学
以产物生成量(或反应物减少量)为纵坐标、反应时间为横坐标作图所得到的一条曲线,称为反应进程曲线(或反应时间曲线、速率曲线、时间曲线)
t1 t2 时间t
图5-1 酶促反应进程曲线
吸光度A
延滞期
线性期
非线性期
(一)延滞期(lag phase、延迟期)
特点:为反应的初始阶段,反应速率一开始时较慢,通常为几秒到几分钟
t1 t2 时间t
图5-1 酶促反应进程曲线
吸光度A
线性期
非线性期
R1
R2
延滞期
孵育期
延滞期