实验七 酶的特性.ppt

酶的特性
【目的要求】
加深对酶的性质的认识。
【基本原理】
本实验由温度对酶活力的影响;PH对酶活力的影响;酶的激活剂及抑制剂;酶的专一性4组实验组成。
(一)温度对酶活力的影响
酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-40℃,植物酶的最适温度为50-60℃。
酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100℃,其活性并无明显的改变,但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低酶或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。
(二)PH对酶活力的影响
酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。。
(三)唾液淀粉酶的活化及抑制
酶的活性受活化剂或抑制剂的影响,***离子为唾液淀粉酶的活化剂,铜离子为其抑制剂。
酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。
(四)酶的专一性
淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。
【实验用品】
:
:试管及试管架, 恒温水浴,冰浴,沸水浴,吸管,滴管,锥形瓶
:
稀释30倍的唾液(用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使其流入量筒并稀释30倍。混匀备用。)
KI-I2碘溶液(将KI 20g及I210g溶于100ml水中,使用前再稀释10倍。)
M Na2HPO3溶液,1% NaCl溶液,1% CuSO4溶液,1%Na2SO4溶液,2%蔗糖溶液, %淀粉溶液,
% NaCl的1%淀粉溶液,%%NaCl溶液
%%淀粉溶液,
表1 温度对酶活力影响实验加样顺序
管号
1
2
3
4
%% NaCl溶液(ml)




冰浴5min
稀释唾液(ml)(已冰浴5min )
1
1
1
1
冰浴5min
37℃恒温水浴5min
沸水浴5min
冰浴5min后转37℃恒温水浴5min
KI-I2液
1-2滴
(一)温度对酶活力的影响
【方法步骤】
1
2
3
4
Na2HPO3溶液(ml)

3


(ml)

2


PH
5


8
%% NaCl溶液(ml)
2
2
2
2
稀释唾液(ml)
2
2
2
2
混匀,于37℃恒温水浴中保温
(二)PH对酶活力的影响
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀,并依次置于37℃恒温水浴中保温。
待向第4管加入唾液2ml后,每隔1分钟由第3管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1小滴KI-I2溶液。添加KI-I2溶液,检验淀粉的水解程度。待混合变为棕黄色后,向所有试管依次添加1-2滴KI-I2溶液。添加滴KI-I2溶液的时间间隔,从第1管起,亦均为1分钟。
观察各试管中物质呈现的颜色,分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。
(三)唾液淀粉酶的活化及抑制表3 唾液淀粉酶活化及抑制实验加样顺序
管号
1
2
3
4
%淀粉溶液(ml)




稀释的新鲜唾液(ml)




1% NaCl溶液(ml)

-------
------
-------
1% CuSO4溶液(ml)
-------

-------
-------
1% Na2SO4溶液(ml)
-------
-------

-------
蒸馏水(ml)
-------
-------
-------

37℃恒温水浴中保温5分钟
KI-I2溶液(滴)
2-3
2-3
2-3
2-3
(四)酶的专一性 表4 淀粉酶专一性加样顺序
管号
1
2
3
4
1%% NaCl溶液(滴)
4
4
2%蔗糖溶液(滴)
4
4
唾液稀释唾液(ml)
1
1
蒸馏水(ml)
1
1
37℃恒温水浴中保温5分钟
Benedi