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在金霉素链霉菌中对四环素生物合成过程.pptx

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四环素生物合成基因簇
基因簇大小约为30kb,由23个基因组成,包括结构基因3个,调控基因17个,抗性基因3个
存在4个加氧酶oxyE, oxyL, oxyR, oxyS
oxyL作用在12a和5位上氧化加羟基
oxyE作用辅助oxyL发挥作用
oxyR作用推断为具有非催化的协同作用
osyS阻断实验结果:产生一个17C的化合物
提总DNA,做PCR
结果:有非特异性条带然后在1kb
左右回收连在T载体上酶切验证
发现多了一个BamH1酶切位点
PCR下一段
培养的金霉素链霉菌一直没有孢子
最近第2代因为换了麸皮长出孢子,量很少
用没有长出孢子的斜面做菌丝培养提总DNA
上面是龟裂链霉菌基因簇
下面是金霉素链霉菌基因簇
由图可见基因相似但是顺序不一样所以要把P出的片段测序再查一下金霉素链霉菌基因簇

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