探讨田基黄对小鼠急性肝损伤的防治作用.doc

探讨田基黄对小鼠急性肝损伤的防治作用.doc探讨田基黄对小鼠急性肝损伤的防治作用
关键词: 田基黄;四***化碳;肝损伤;抗氧化;细胞因子

田基黄原名地耳草,系藤黄科金丝桃属植物地耳草Hypericum japonicum Thumb的干燥全草。味甘、微苦,性凉,归肝、胆、大肠经。具有清热利湿、散淤止痛、消肿解毒的功效[1]。生于田野较湿润处,广布于长江流域及其以南各地,主产于江西、福建、广东、广西、四川、贵州等地。含有黄***类、内酯类、色原烯类、缩二氨酸衍生物、咕吨***类、间环己三醇衍生物等化合物[2]。现代药理研究表明,田基黄具有抑菌、抗病毒、保肝、抑制癌细胞、增强免疫、抗氧化、止血以及对心血管的双向调节等多种药理学功效[3]。为探讨田基黄保肝降酶的作用机制,l4诱导小鼠急性肝损伤的动物模型,对其进行研究观察。l4所致小鼠急性肝损伤的药理作用机制的研究结果报道如下。
1 器材
动物清洁级昆明种健康小鼠60只,体重18~22 g,雌雄各半,动物由福建中医学院实验动物中心提供,许可证号:SYXK(闽)2005-0003,正常喂养,置实验室适应环境3 d后进行实验。
药材与试剂
田基黄购自福建中医学院国医堂医院,并经鉴定为藤黄科植物田基黄的全草;l4),上海中国联化化工试剂有限公司产品,批号20051022,分析纯;生理盐水注射液,福州福药制药有限公司产品,批号050103A07;AST,ALT,NO,SOD,MDA测试药盒,南京建成生物工程研究所产品;TNF-α、IL-6试剂盒,解放军总医院科技开发中心放免所产品。
仪器
LXJ-2B低速大容量离心机、DDL-5低速冷冻离心机,上海安亭科学仪器厂产品;。
2 方法
药物及试剂配制田基黄用冷水浸泡,煎煮2次,过滤,合并滤液,浓缩成含生药2 g /ml的水煎液,,, g/ml溶液,各以低、中、高剂量标之;将联苯双酯(BPD)滴丸配制成20 mg/ml的溶液;% CCl4花生油溶液是用新鲜纯花生油作为溶剂按体积比配制。其他测试试剂按相关的药盒说明书进行配制。
动物造模给药取小鼠50只,称重,按性别、体重随机分为5组(l4模型组、田基黄低剂量组、田基黄中剂量组、田基黄高剂量组),每组10只,雌雄各半。l4模型组予以生理盐水灌胃,余各组予以田基黄低、中、高剂量提取物溶液灌胃, ml/10 g体重灌胃量给药,1次/d。于第1,4天在给药30 min后,空白组腹腔注射生理盐水,l4溶液, ml/10 g体重注射,正常喂养,连续7 d。
取材于末次给药24 h后取材,摘眼球法取血约1ml,4℃ 3 000 r/min离心10 min分离血清,于-20℃保存待测;取血后处死小鼠,立刻剖开腹腔,暴露肝脏,剪取小块右叶中央部位肝脏组织, cm× cm× cm,迅速投入10%福尔马林溶液中固定,常规切片,HE染色,光镜下作组织病理学检查。
指标检测各指标分别按相关的试剂盒操作说明书进行;肝组织病理学检查,在光镜下观察肝组织切片的病理形态学变化。肝组织病理学改变分为5级:正常肝细胞“-”;肝细胞点状坏死“+”;肝细胞灶状坏死“++”;肝小叶不足1/3肝细胞坏死“+++”;