胡红红博士学位论文.doc

HUAZHONG AGRICULTURE UNIVERSITY
博士学位论文
Ph D DISSERTATION
水稻逆境相关转录因子的分离和功能鉴定
ISOLATION AND FUNCTIONAL CHARACTERIZATION OF RICE STRESS - RELATED TRANSCRIPTION FACTORS
研究生: 胡红红
CANDIDATE HU HONGHONG
导师: 熊立仲教授
张启发教授
SUPERVISER PROFESSOR XIONG LIZHONG
PROFESSOR ZHANG QIFA
专业: 生物化学与分子生物学
MAJOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR
BIOLOGY
研究方向: 水稻分子生物学
RESEARCH RICE MOLECULAR BIOLOGY
中国武汉
WUHAN,CHINA
二OO六年十一月
NOVEMBER, 2006
分类号密级
华中农业大学博士学位论文
水稻逆境相关转录因子的分离和功能鉴定
ISOLATION AND FUNCTIONAL CHARACTERIZATION OF RICE STRESS-RELATED TRANSCRIPTION FACTORS
博士研究生: 胡红红
指导老师: 熊立仲教授
张启发教授
指导小组: 熊立仲教授
张启发教授
王石平教授
周道绣教授
林拥军教授

专业:生物化学与分子生物学研究方向:水稻分子生物学
论文提交时间:2006年11月学位授予日期:
华中农业大学生命科学技术学院
二00六年十一月
目录
缩写名词表 I
摘要 II
Abstract IV
1 文献综述 1
1
不同逆境下植物的生理变化和抗逆性评价 3
5
5
7
9
AP2/EREBP 9
bZIP转录因子 12
Zinc finger 转录因子 13
MYB/MYC 转录因子 14
NAC转录因子 14
转录因子在逆境抗性基因工程中的应用 17
18
基因功能丧失方法(Loss of function) 19
反义抑制和共抑制 19
插入突变 19
RNA 干扰(RNAi) 20
21
(Over-expression) 22
(Inducible expression) 22
DNA Microarray 22
酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system) 23
23
农杆菌介导的遗传转化系统和抗性标记基因的使用 23
现有抗性标记基因的不足 24
无标记筛选转基因植株的技术 25
安全标记基因的应用 26
本研究的目的和意义 27
2 材料与方法 28
水稻材料 28
用于遗传转化的水稻基因片段 28
实验所用到的菌株、质粒、载体和感受态细胞 28
DNA的抽提和Southern杂交 28
RNA的抽提,反转录和Northern杂交 30
30
30
30
RNAi抑制表达载体的构建 31
GFP融合表达载体的构建 32
遗传转化 33
目标蛋白的亚细胞定位分析 33
通过遗传转化分析目标蛋白的亚细胞定位 33
通过瞬时表达分析目标蛋白的亚细胞定位 33
酵母细胞中的生化实验 34
34
35
GFP的表达观察 35
GUS组织化学分析和GUS活性测定 35
36
SNAC1超量表达转基因植株叶片电镜观察 37
SNAC1超量表达转基因植株在干旱胁迫下的相对含水量 38
SNAC1超量