ABCG5和ABCG8在肝脏胆固醇转运和胆囊胆固醇性结石形成中的作用.pdf

复旦大学
博士学位论文
ABCG5和ABCG8在肝脏胆固醇转运和胆囊胆固醇性结石形成中的
作用
姓名:沈振斌
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:秦新裕
20040425
⋯.~论文使用授权声明论文独创性声明一本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此作者签名:并表示了谢意。规定。导师签名:.日期:。
虯在肝脏胆固醇转运和胆囊胆固醇性结石形成中的作用中文摘要细胞系分别用标记的胆固醇、游离胆固醇、卵磷脂、无脂血清作用使细胞内分钟测定培养液中标记的胆固醇含量计算外运的胆固醇数量。研究发现转染虯基因导入人肝肿瘤细胞系中,观察细胞胆固醇转运能力的虯在胆固醇转运中的作用胆固醇饱和,随后用牛磺胆酸钠/卵磷脂受体系统进行胆固醇外运实验。每虯与胆固醇性结石形成的关系探讨虯与结石形成的关系。测定结石组病人结石胆固醇含量,胆囊结石是一种常见病,在我国自然人群发生率约为%左右,也就是亿人左右。目前尚没有有效的预防方法,有症状后往往需要手术治疗,花费了大量的医疗资源。因此了解胆囊结石形成的机制有助于为预防和非手术治疗该疾病提供依据。由于胆固醇不能随意跨越肝细胞的胞膜,胆固醇的分泌又并非完全与磷脂的分泌耦连,位于肝细胞膜表面的胆固醇转运体可能是调节胆固醇分泌的关键环节。缒ぷT颂寮易逯械腁和谛〕透卧嘀杏懈弑泶铮物位于细胞膜形成管腔的一端,与胆固醇逆向转运有关,可能参与肝脏向胆汁排泄固醇的过程,两者的确切作用尚不十分清楚。本研究通过转基因的方法将小鼠改变,从而对上述基因功能作出判断。同时对胆固醇性结石病人中虯与结石形成的关系作了初步的探讨。验证虯在胆固醇转运中的作用。通过脂质体介导将含或虯的质粒导入细胞系,通过抗生素、筛选获得后含有虯的稤赴档ü檀甲T四芰γ飨愿哂谄溆嗔街晗赴系,而仅含有卜细胞系胆固醇转运能力无明显变化,ü檀纪庠说淖饔茫秸弑匦胄纬梢於厶宀拍苄惺拐庵肿用。此外,用虷昙呛蟛⒉挥跋霢和⒒庸δ堋一、新的细胞系—与一。用及等方法证明细胞系稧中分别含有珹和籊卜二、
确定为胆固醇性结石。比较禁食情况下胆固醇性结石病人和胃癌病人中血脂、脂,%..;.%,,说明决定结石的形成。由于虯行使肝细胞跨膜转运胆固醇的功能,因此蛋白差异,采用实时椒ū冉系ü檀夹越崾∪擞胛赴┎∪薃和的差异。两组病例血脂、脂蛋白比较无明显差异。胆固醇性结石组胆固醇性结石病人在基础情况下虯有较高的转录水平,意味着产生更多胆圃醇跨膜转运蛋白。本实验提示胆固醇性结石的形成与肝脏弑泶铮虻ㄖ凶T私隙嗟牡ü檀加泄亍本研究认为虯在肝细胞胆固醇外运中发挥重要作用,两者需形成二聚体行使功能。胆固醇跨膜转运是胆固醇向胆汁排泄的关键步骤,其速度两者在肝细胞中高表达是结石形成的关键。关键词:胆囊结石均高于胃癌组小结:胆固醇逆向转运结石成因和痓猘
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确,但其中的分子生物学机制尚不完全清楚。腺苷三磷酸结合盒转运体小管的崾続在肝细胞中的作用是促使胆固醇进入血液而非排泄%サ牡ü檀己土字淖T耸芤种疲浠聿煌贏,而与分泌醇的机制。虯是易錑亚家族的新成员,与该家族其余两个动子。恢补檀佳V⑹且恢趾奔闹蚀灰斐5某H旧迦毕菪约膊。两点是小肠上皮细胞对植物固醇及其它固醇吸收增加,而在胆汁中浓聚障碍,结果有高胆固醇血症。”,导致脸黄瘤和早期形成动脉粥样硬化,给予小鼠赢胆固醇饮前言机体维持胆固醇代谢平衡有两个途径,一是减少肠道吸收,二是通过逆向转运”。将外周组织中多余的胆固醇运输到肝脏并排泄到胆汁中。在肝脏中多余的胆固醇直接或是转化为胆汁酸间接排到胆汁中。尽管在生理学上这两条途径已很明胆固醇的逆向转运有关。猘狪依赖的细胞脂质外运所必需“斡细胞胆固醇的外运。此外Щ钤黾有〕ξ盏ü檀嫉哪芰Γ崾続能使吸收到小肠粘膜细胞中的胆固醇重新运回到肠腔,为清除体内多余的胆固醇提供了一个保护机制。肝脏中表达的ㄎ挥诟蜗赴啄け砻娑亲槌傻汁中‘“。诘ズ讼赴械谋泶锬J接階O嗨疲琒”。等认为遣斡刖奘上赴势胶獾陌谢颉表达被阻断后巨噬细胞受抑制有关。然而仅仅对于虯的认识不能解释肝脏向胆汁排泄胆固成员虯一样,虯作为跨膜转运蛋白,参与胆固醇逆向转运诩跎俪Φ牢展檀己痛俳卧嗯判构檀迹刂蒲=檀***剑持机体固醇平衡中发挥重要