血细胞计数培训课件-课件（ppt·精·选）.ppt

试剂质量检验部——
血细胞的分类与计数
血细胞的生成及分化
血液涂片的制备
1、每份样本制作3张血涂片。要求所用玻片清洁、干燥、无尘,大小为25 mm×75mm,~。并有明确标记。如果样本中白细胞数量少时,需要制备更多血涂片(如6张)。
2、使用EDTA-K2抗凝血液样本时,应在采集后4小时内制备血涂片。在制片前,样本应充分混匀。注意,样本不能冷藏。
3、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端1/3处,加一滴()充分混匀的血液,握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片,以30º~45º角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。
4、在1小时内,用Romanowsky类型染液染色;或在1小时内,用无水甲醇(含水量﹤3%)固定后染色。
推片技巧
推片倾斜45°±1,推成血膜长度25~35mm,宽度18~20mm,血膜四周留有空隙区,血膜终尾离玻片终端至少10mm,血膜均匀,薄如蝉翼,尾端形如弧状,迅速扇(摇)干,血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。此外,涂片时,还要考虑患者的血液状态,如贫血程度、血液粘稠度、WBC或有核细胞多少等因素,调整推片技巧。
血膜至玻片边缘约5mm
血膜至玻片一端约为总长1/3
血涂片头部,涂片厚
血涂片体部的检查区域
血涂片尾部,涂片太薄
良好血涂片的要求
血膜至少长25mm,至玻片两侧边缘的距离至少为5mm。
血膜边缘要比玻片边缘窄,且边缘光滑,适用于油镜检查。
血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布,末端呈方形或羽毛状。
血膜末端无粒状、划线或裂隙。所有这些情况会使白细胞集中在这些区域内。
在镜检区域内,白细胞形态应无人为异常改变。通常,随着保存时间的延长,抗凝血会造成白细胞形态的改变,如胞浆内形成空泡,核分解破裂等。应将抗凝血液保存时间的影响减小到最低限度。除部分淋巴细胞增生性疾病外,镜检区域内破损白细胞量应<2%。
无人为污染。
瑞氏染色-姬姆萨( Wright’s-Giemsa’s)混合染色
瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。
姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。
故采用以瑞氏染液为主,姬姆萨染液为辅的混合染色。
染色步骤
先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖;
稍等片刻再加姬姆萨染液2-3滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定);
稍等1-2分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入;
染色30-40分钟;
分色:用自来水缓缓冲洗至少3分钟以上,待干,勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
血涂片检查的方法和程序
将血液充分混匀,尽早推成血片并染色。
先用低倍或高倍镜观察。了解血片染色和细胞分布情况、有无血小板或红细胞聚集(成串、成堆),尾部有无大型、成堆异常细胞等;继续用油镜在涂片厚薄适中处浏览血片,仔细观察红细胞、白细胞及血小板的形态,并估计其数量。如果观察结果与仪器报告相符,不需进行任何补充试验,即可按仪器测定的结果发出报告。
如为贫血或其他血液病患者,其红细胞数量及相关的指标(如MCV、MCH、MCHC)红细胞体积分布宽度(RDW)、直方图或散点图出现异常,则着重观察红细胞的大小、形态、内涵物、着***、大小一致性以及有无有核红细胞等。如有异常,应加以描述并报告。
正常情况下,在血片厚薄适中区域(每个红细胞彼此相互接触但双不重叠),每个油镜视野,约有血小板8~15个;或每10~30 个红细胞见到一个血小板。