移液管和可调式移液器的使用与误差分析.ppt

三峡大学医学院生物化学教研室
实验三血清总蛋白、白蛋白及白/球比值的测定
临床生物化检验实验(一)
蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品、药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,则是经常进行的一项非常重要的工作。
血液的组成:
血液的组成
红细胞
白细胞
血小板
血细胞
血浆
红细胞
(40%—50%)
血浆
50%~60%
白细胞,血小板
血浆(plasma)
——血液中加入抗凝剂后离心,使血细胞下沉,
所得到的上清.
血清(serum)
——血液凝固后析出的淡黄色透明液体
血浆=血清+纤维蛋白原+凝血因子
血浆与血清的区别
全血血浆血清
(blood)(plasma) (serum)
实验目的
1、熟悉血清总蛋白的测定方法(双缩脲法)
2、熟悉血清白蛋白的测定方法(溴甲酚绿法)
3、掌握血清总蛋白、白蛋白和白/球比值测定的临床意义
问题:如何测定蛋白质的浓度?
根据蛋白质不同性质建立的蛋白质浓度测定方法:
物理性质:紫外分光光度法
化学性质:凯氏定氮法、双缩脲法(Biuret)、Lowry法(Follin-酚法)等
染***质:考马斯亮蓝染色法(Bradford法)
在选择方法时应考虑
实验对测定所要求的灵敏度和精确度
蛋白质的性质
溶液中存在的干扰物质
测定所要花费的时间
PartⅠ总蛋白的测定(双缩脲法)
a1 3%~4%
a2 6%~10%
b 7%~11%
g 9%~18%
总蛋白
(60~80g/L)
白蛋白:62~71%
球蛋白:29~38%
白/~
临床意义

①血液浓缩,导致总蛋白浓度相对增高;
②血浆蛋白质合成增加。

①血液稀释,导致总蛋白浓度相对降低;
②摄入不足和消耗增加;
③合成障碍;
④蛋白质丢失。