2.2.2植物细胞融合与单体克隆抗体[资料].ppt

动物细胞融合与单克隆抗体
太原市外国语学校
赵成艺

为什么“甲流”康复者或接种疫苗1月以上者的血浆会成为救治重症“甲流”患者的妙药?
血浆中的抗体会与“甲流”病毒反应,从而将病毒消灭。

获得抗体的传统方法
把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。
缺点:
人们发现,B淋巴细胞尽管可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。
怎样才能获得大量的单一性抗体呢?
产量低
纯度低
特异性差

怎样才能获得单一性抗体?
大量克隆单一的B淋巴细胞
其寿命仅有几天,无法长期体外培养
动物细胞培养技术
骨髓瘤细胞
无限增殖
杂交瘤细胞
产生抗体
无限增殖
细胞
融合

G. Kohler
C. Milstein
英国科学家米尔斯坦和科勒于1975年设计和实践了这个想法,并获得成功。摘得1984年诺贝尔生理及医学奖。

一、动物细胞融合技术
:
动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。

2、动物细胞融合基本原理
细胞膜的流动性
3、诱导方式
物理法:
化学法:
生物法:
灭活的病毒
电激、振动、离心
聚乙二醇(PEG)
如:仙台病毒
为什么要用灭活的病毒?
仙台病毒
物理/化学方法
丧失感染活性
保留融合活性

灭活的病毒
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞融合, 形成杂种细胞

4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞融合原理
细胞融合的方法
诱导方法
用途
获得杂种植株
细胞膜的流动性
细胞膜的流动性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
使细胞分散后诱导细胞融合
物理(离心、振荡、电刺激)
化学(聚乙二醇)
物理、化学方法(同左)
制备单克隆抗体
灭活的病毒

二、单克隆抗体的制备
用抗原免疫小鼠
骨髓瘤细胞的培养
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
融合
多种细胞
依挺雁候颖瑞烁李***