选修1.1第一章　微生物的利用.pptx

选修1 生物技术实践专题
第一章微生物的利用
核心理解突破
◎迁移升华思维的加油站◎
考点一大肠杆菌的培养和分离
:是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,在肠道中一般对人无害,是原核生物,是基因工程中广泛采用的工具。

(1)培养基按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。
(2)各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子五类营养物质。
(3)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基
制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:计算→称量→溶化、调pH→灭菌→倒平板。

(1)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。应根据情况进行消毒和灭菌。
①消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,还有化学药剂(如酒精、***气、石炭酸等)消毒、红外线消毒等。
②灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。
(3)无菌操作要求
①首要条件是各种器皿必须是无菌的。
②各种培养基必须是无菌的。
(2)消毒与灭菌的区别
③菌转移操作的过程必须是无菌的。
(4)灭菌方法
①常用高压蒸汽灭菌法。即用高压蒸汽灭菌锅在 121 ℃(1 kg·cm-2压力)下灭菌15 min。
②干热灭菌,用干热灭菌箱对耐热器具在160 ℃维持 2 h 或170 ℃维持1 h灭菌。
③酒精灯灼烧法:如接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌。酒精灯火焰上方无菌区,可使菌转移过程在无菌条件下完成。
④利用紫外灯照射灭菌。用紫外灯照射灭菌30 min。
以上灭菌原理是使细菌体内蛋白质变性而达到杀灭细菌的目的。
(5)消毒方法
①煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,可用于培养器皿的消毒。
②巴氏消毒法:80 ℃中15 min或70~75 ℃中30 min,实际生产中常用于鲜奶的消毒。
③70%乙醇消毒法:70%乙醇杀毒能力最强,常用于实验时操作者手臂的消毒。
(6)含抗生素的牛奶不能发酵为酸奶的原因:牛奶发酵成酸奶是利用
乳酸菌来完成的。乳酸菌属于细菌,抗生素有抑制甚至杀死细菌的作用。

(1)细菌的培养
①用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌,细菌以分裂方式繁殖,分裂速度很快,条件适宜时,20分钟可分裂一次。
②如要将已有细菌培养物转移到新的培养基时,一般用接种环转移带菌的培养物。