copd理论探讨及参芪补肺汤含药血清抑制copd肺气虚证气道平滑肌细胞增殖的分子机理-中医内科学（呼吸内科）专业毕业论文.docx

贵阳中医学院硕士学位论文
中文摘要
目的:
总结。
(ASMCs)增殖的分子机理。
方法: ,查阅导师论文著作文稿、历届研究生
论文以及拜访请教老师,接受言传身授,跟师随诊、实时采集病历、整理病历等方式收集整理资料。
(采用香烟烟熏复合气管注射脂多糖方式造模)。无菌取空白组和COPD肺气虚证模型组的SD大鼠气道平滑肌组织进行消化后进行原代培养,将培养的细胞分为空白组(空白组大鼠气道平滑肌组织经原代培养细胞)、模型组、中药低剂量组、高剂量组以及氨茶碱组(后四组细胞为COPD肺气虚证模型大鼠气道平滑肌组织消化细胞),共5个组。空白组不予处理:模型组加入香烟提取物(CSE)及正常组血清;中药低剂量组中加入CSE及中药低剂量组含药血清;中药高剂量组中加入CSE及中药高剂量组含药血清;氨茶碱组中加入CSE及氨茶碱。采用增殖细胞核抗原(PCNA)细胞免疫组织化学检测大鼠ASMCs增殖;用四***偶氮唑蓝(MTT)法检测大鼠ASMCs 增殖活性;用免疫组化和Western blot法检测各组ASMCs中HDAC2、乙酰化组蛋白H4以及NF-KBp65蛋白的表达;用实时荧光定量PCR方法检测各组ASMCs 中HDAC2mRNA以及NF—kBp65mRNA的表达。
结果: 、脾、肾三脏亏虚兼夹有痰阻血瘀,
其经验方参芪补肺汤具有益气补肺活血化痰的功效,对COPD肺气虚证患者有良
好疗效。
:与空白组比较,模型组的ASMCs增殖活性均明显增高, 显著差异();与模型组相比,中药低剂量组的ASMCs增殖活性无明显差异(),中药高剂量组和氨茶碱组的ASMCs增殖活性明显下降,显著差异
万方数据
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()。
:与空白组比较,模型组乙酰化组蛋白H4、NF-K Bp65、 PCAN的蛋白表达明显升高,HDAC2的蛋白表达明显降低,均有显著差异(); 与模型组比较,中药低剂量组中HDAC2、乙酰化组蛋白H4、 A 的蛋白表达无显著差异();中药高剂量组中HDAC2的蛋白表达明显增高, 乙酰化组蛋白H4、NF-K A的蛋白表达明显降低,均有显著差异();氨茶碱组中I-IDAC2的蛋白表达明显增高,NF_K Bp65、PCNA的蛋白表达明显降低,均有显著差异(),乙酰化组蛋白H4的蛋白表达无显著变化()。
:与空白组比较,模型组NF-K Bp65mRNA表达均明显增高,HDAC2mRNA的表达明显降低,有显著差异()。与模型组比较, 中药低剂量组NF_K Bp65mRNA的表达和I-IDAC2mI州A的表达无明显差异(); 中药高剂量组HDAC2mRNA的表达明显增高,NF_K Bp65mRNA的表达明显降低,有显著差异();氨茶碱组I-IDAC2mRNA的表达明显增高,NF—K Bp65mRNA的表达均明显降低,有显著差异()。
-blot结果:与空白组比较,模型组乙酰化组蛋白H4的蛋白表达和NF_K Bp65的蛋白表达均明显增高,HDAC2的蛋白表达明显降低,均有显著差异()。与模型组比较,中药低剂量组乙酰化组蛋白H4的蛋白表达、NF_ K Bp65的蛋白表达和HDAC2的蛋白表达无明显差异(P>);中药高剂量组 HDAC2的蛋白表达均明显增高,乙酰化组蛋白H4的蛋白表达和NF_K Bp65的蛋白表达均明显降低,均有显著差异();氨茶碱组IiDAC2的蛋白表达明显增高,NF-K Bp65的蛋白表达均明显降低,均有显著差异(),乙酰化组蛋白H4的蛋白表达无显著差异()。
结论:
,重视益气补肺活血化痰,组方的参芪补肺汤临床疗效好,实用性强值得推广。
经CSE刺激后存在异常增殖。
-K Bp65的表达增高,HDAC2
2
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的表达减少,证实了乙酰化组蛋白H4、HDAC2以及NF-K Bp65参与了COPD肺气
虚证大鼠ASMCs增殖。
,其