cxcl12及其受体cxcr4对肝细胞癌生物学行为影响的研究-外科学(普通外科)专业毕业论文.docx

华中科技大学同济医学院 博L学位论文
组织RNA,RNA样本经逆转录反应合成CXCLl2、CXCR4和8一actin cDNA第1 链。以cDNA第1链为模板行PCR扩增CXCLl2、cxcR4和13-actin:Western blot 检测癌组织和癌周组织CXCLl2和CXCR4蛋白表达:用凝胶成像系统扫描并分析结果。
结果原发性肝细胞癌癌组织/癌周组织cxCR4mRNA表达的相对比高于 CXCLl2mRNA表达的相对比,差异有非常显著性;原发性肝细胞癌 CXCLl2mRN表达低于其配对癌周组织,差异有非常显著性;CXCR4 mRNA表达低于其配对癌周组织,差异无显著性。原发性肝细胞癌CXCR4 mRNA表达与 C)(cLl2mRNA表达有显著相关性。CXCLl2和CxCR4蛋白表达与mRNA表达
基本一致。CXCLl2表达与HBsAg有非常显著相关性。结论本研究首次探讨了CXCLl2及其唯一受体CXCR4在国人肝细胞癌和癌周组织中的表达,该表达有其特异性,可能和肝细胞癌的多个生物学行为相关。 CXCLl2和CXCR4在肝细胞癌中的表达和HBV的相关性可能与肝细胞癌的发生相关。二者在肝细胞癌和癌周组织中的表达特性是肝细胞癌生物学行为研究的基础,是肝细胞癌微生态环境对其影响的重要研究方向。其相互作用机制以及对肝细胞癌转移的作用机理有待进一步深入研究。关键词趋化因子;CXCLl2;CXCR4:癌,肝细胞;癌周组织
第二部分CXCLl2和受体CXCR4在肝细胞癌肝内转移
中的作用及其与VEGF的相关性目的探讨趋化因子CXCLl2和受体CXCR4在肝细胞癌的表达对肝内浸润转移的作用以及与VEGF表达的相关性,为肝细胞癌肝内转移探讨新的机制和治疗方法。
(RT-PCR)矛I]蛋白印迹法(western blot)分别检测37例肝内转移肝细胞癌标本中原发灶、转移灶及其配对癌旁组织CXCLl2、 CXCR4和VEGFmRNA和蛋白表达。
结果CXCLl2、CXCR4在原发灶、转移灶和癌旁组织均有表达。CXCLl2和
CXCR4mRNA和蛋白表达基本一致,CXCR4在转移灶的表达高于原发灶。原发
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灶和转移灶CXCLl2表达低于癌旁组织,CXCLl2、CXCR4表达与肝细胞癌肝内转移有显著相关。原发灶和转移灶VEGF表达均高于癌旁组织。CXCR4和 VEGF的表达有显著相关性。结论CXCLl2诱导CXCR4激活的肝癌细胞的肝内侵袭和转移,VEGF促进 CXCR4的表达和激活,CXCLl2、CXCR4和VEGF的相互作用参与肝细胞癌的肝内转移机制。干预CXCLl2和CXCR4相互作用是阻断肝细胞癌肝内转移的潜在靶位:CXCLl2、CXCR4可能是肝细胞癌重要的免疫学分期、预后指标和新的肝内转移治疗途径。
关键词趋化审亍;cxc喂;cx(搿;零肝粤碑;血管内皮生长因子:肿
瘤转移
第三部分CXCLl2及其受体CXCR4在ItepG2细胞中的表达及意义
目的本研究旨在检测趋化因子CXCLl2及其受体CXCR4在HepG2细胞中的表达并探讨其相关性,为进一步研究其对HepG2生物学行为影响的动物实验研究提供理论和实验依据。
方法HepG2细胞生长于含10%胎牛血清的RMPI 1640培养液中,在37。C、5
%C02培养箱中进行培养。通过总RNA提取、逆转录反应合成cDN***段、PCR 反应行半定量RT-PCR检测HepG2细胞CXCLl2和CXCR4 mRNA的表达。用蛋白质印迹法(western blot)对CXCR4、CXCLl2蛋白表达进行定量分析。结果HepG2细胞CXCR4和CXCLl2mRNA与蛋白结果基本~致,CXCR4mRNA 和蛋白表达高CXCLl2,差异有非常显著性。
结论CXCR4、CXCLl2的表达与其生物学功能相关,HepG2细胞CXCR4的表达和CXCLl2的结合相关。CXCR4与CXCLl2的差异性表达可能是由于CXCLl2 可下调CXCR4的表达,CXCLl2的表达下降或缺失可使CXCR4的表达升高, 其相互作用机制有待进~步研究。HepG2细胞CXCR4、CXCLl2的表达可用于
动物实验研究进~步阐明CXCR4、CXCLl2的生物学功能。
关键词趋化囡子:CXCLl2; CXCR4:HepG2
气 × X
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Effectsof CXCLl2 and its Receptor CXCR4 on Biological Behaviors of Hepatocellular Carcinoma
HCC is one of the severely malign