grp78表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响-内科学专业毕业论文.docx

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签字日期:赴虹年』月旦日
GRP7 8表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响
硕士研究生:姜 莉指导教师:王 琪 教授指导小组:王 琪 教授专业名称:内科学
摘 要
目的:、免疫荧光细胞化学等分子生物学技术,检测在 Ca2+ (GRP78)的表达水平,。方法:将一定密度、生长状态良好的SPCAl细胞随机分为抑制组(加
,浓度为0、1 O、20、30、40、)、诱导组(加入A23 1 87,
浓度为2pM)及对照组(加入PBS)。、免疫荧光细胞化学方法检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。 6(浓度为309M),利用流式细胞仪测定细胞生存率。,。
结果: GRP78的表达,且 。抑制组的荧光强度明显弱与诱导组和对照组。A23 1 87在基因和蛋白水平均能诱导GRP78 的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示:抑制组细胞凋亡率高于对照组和诱导组,而诱导组细胞凋亡率最低。
结论:本实验研究结果表明: SPCAl核酸和蛋白水平GRP78的表达,而A23 1 87能够诱导GRP78表达。 6作用下细胞的凋亡率具有相关性,GRP78 表达越高,细胞生存率越高。 6 的耐药性,且其耐药性与GRP78表达的程度有关。在基因水平干预 GRP78的表达,一方面能够减弱GRP78对肿瘤细胞的保护作用,另一方面能够减低肿瘤细胞对化疗药物的耐药,促进肿瘤细胞的凋亡,提高化疗药物疗效,这一手段可能成为未来治疗肺癌的新办法。
关键词:GRP78 耐药 A23187
Down--regulation of the endoplasmic reticulum chaperone
GRP78/Bip by BAPTA—AM contributes to attenuate
the protective effect of GRP78 in lung cancer
Master degree candidate:Li Jiang
Supervisor:Professor:Qi Wang
Vice-supervisor:Professor:Oi Wang Maj or:Internal Medicine
Abstract
Objectives:To investigate the relationship between the expression of GRP78 and resistance to anti··cancer drug VP··1 6 in vitro in lung adenocarcinoma SPCA l cell line.
Methods: and A23 1 87 were used to inhibit or induce the
expression of GRP7 —PCR was used to detect the expression of GRP78 at gene level and immuno￡1uoreseence at protein level after cells treated by chemicals at different viability was detected by flow cytometry after cells exposed to VP·1 6.
Results:The expression of GRP78 at both mRNA and protein levels decreased obviously in SPCAl cell line inhibited