白芍总苷对大鼠体内细胞色素p450的调控作用研究-中药学专业论文.docx

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万方数据
目 录
中文摘要 ..1
英文摘要 ..5
英文缩写 10
研究论文 白芍总苷对大鼠体内细胞色素P450的调控作用研究
引言 .11
第一部分 白芍总苷对正常大鼠CYP450亚型酶的影响
—1L——i一
日U舌 13
材料与方法 13
结果 .23
附图 .25
附表 32
讨论 35
小结 36
参考文献 36
l4肝损伤大鼠CYP450亚型酶的影响
只U舌 38
材料与方法 38
结果 39
附图 ...42
附表 50
讨论 54
小结 56
参考文献 56
结论 57
综述中药对细胞色素P450影响的研究进展 .58 致谢 66
个人简历 67
万方数据
中文摘要
白芍总苷对大鼠体内细胞色素P450的调控作用研究
摘 要
目的:白芍总苷(Total glucosides of paeony,TGP)是白芍的有效部位,主要含有芍药苷(paeoniflorin,Pae)、芍药内酯苷(albiflofin,Alb) 等单萜类成分。现代药理学研究证实TGP具有明显的保肝作用,能显著对抗多种因素所致的急慢性肝损伤、肝纤维化等。课题组前期对TGP在正常和病理状态下的吸收、分布、排泄进行了系统性的研究,并对白芍总苷在大鼠体内的代谢产物进行了分析。细胞色素P450酶是机体内最重要的药物代谢酶,参与药物及各种内源性、外源性化合物在体内的代谢过程。因此为了更深入的了解TGP在大鼠体内的代谢过程,本实验进一步研究了TGP对细胞色素P450酶的影响,分别采用Western Blot和RT-PCR两 l4肝损伤大鼠6种细胞色素P450亚型酶CYPlA2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C19、 CYP2C9、CYP2E1的影响,以期探讨白芍总苷对大鼠细胞色素P450的调控作用。
方法: I白芍总苷对正常大鼠6种CYP450亚型酶的影响
健康Wistar大鼠25只,a,体重(180-220)g,随机分为5组:空白对照组,TGP低、中、高剂量给药组,阳性给药组。每组5只,正常对照组给予纯化水,TGP低、中、高给药组灌胃给予TGP g/kg、 g/kg、 g/kg,阳性对照组腹腔注射地塞米松注射液75 mg/kg,连续14 天,末次给药24 h后断头处死各组大鼠,迅速取肝,4℃预冷生理盐水中冷却,吸干水分,称重,将肝组织剪碎,洗净血液,分装于冻存管中,液氮速冻,.80℃保存备用。
采用差速离心法制备肝微粒体。肝组织按1:4(g:mL) mol/L蔗糖溶液,匀浆器制备肝匀浆,9000 g离心20 min,取上清液于19000 g离心20 rain,再次取上清液60000 g离心60 rain,下层粉红色沉淀即为
万方数据
中文摘要
肝微粒体, mol/L Tris-HCl(含20%甘油,pH=4)混悬均匀, 分装,干冰速冻,.80。C贮存备用,采用Branford方法测定肝微粒体的蛋白浓度。Western B10t法检测TGP对CYPlA2,CYP3A4、CYP2D6、 CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1蛋白表达的影响
RT-。采用Trizol法提取肝脏
中的RNA。取100 mg肝组织于研钵中研磨至粉末状,转移至EP管中,
加入1 mL Trizol室温下放置5 min,再加入***仿0,2 mL,剧烈颠倒混匀, 室温放置5 min,4℃,12000 g离心15 min, mL EP管中,。C放置30min,然后4℃, 12