低渗性肿胀对豚鼠心室肌细胞动作电位及延迟整流钾电流（i,k）影响的实验研究-心血管内科专业毕业论文.docx

天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要
摘 要
目的:心肌细胞肿胀通常发生于急性心肌缺血及再灌注阶段,细胞肿胀后由于膜受到牵张,给细胞以机械性刺激,引起细胞电生理性质的改变。其中最主要的是多种离子通道的功能受到调节,进而改变动作电位的电生理参数,诱发心律失常的产生。本实验通过低渗液灌流急性分离的单个豚鼠心室肌细胞来模拟这种改变,本实验研究目的在于:,探讨低渗性肿胀引起心律失常的机制。(I。)及其快、慢两种激活成分(I。,及I。。)的通道动力学特征。。,及 I。,离子通道的不同调节作用,用以部分解释缺血一再灌注心律失常发生的离子机制。
t方法:用主动脉逆向灌流法酶解分离得到单个豚鼠心室肌细胞,在倒置相差显微镜下,选择质膜完整、横纹清晰的心室肌细胞,用等渗台式液(300mOsm/kg)以lml/min的速度灌流细胞,利用膜片钳技术经过封接、破膜、电容及串连电阻的补偿形成膜片钳全细胞记录状态。以刺激脉宽3ms, 2倍阈值6hA,记录基础刺激周长(BCL)600ms、1000ms及3000ms下的动作电位,并测量动作电位振幅(APA)、静息膜电位(RMP)及动作电位
时程(APD30、APD50、APD90),改为低渗台式液(200mOsm/kg)灌流, 待动作电位变化稳定后,再重复记录及测量上述参数并与等渗液灌流加以比较;以钳制电压一40mV,阶跃除极至+60mV,去极化时间分别为100ms()和3000ms()的刺激方案刺激等渗台式液灌流的心室肌细胞以记录延迟整流钾电流(I。),灌流液改为低渗液后重复记录I。,测量各去极化电压下的峰值电流幅度及尾电流幅度,失活时间常数(t)并绘制电流一电压关系曲线(I—v曲线),与等渗液灌流相比较。
结果:、RMP及阈电位水平
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无影响。,生理性频率适应性消失,且以APD50及APD90缩短为明显。。。峰值电流幅度及尾电流幅度均明显增加,并且呈平行增加的关系, 因而其IK..JI。比值不变;但使l。,幅度减小且1m;l,IK比值增加。。及I。.tIiI
的I—V关系曲线显示,低渗液灌流下I—V关系曲线向左上移位,电流幅
度在+10mV+60mV电压范围内全面增加。。失活
时间常数(t)降低,提示通道激活及失活的速度可能有所加快。p厂
结论:。,说明低渗性肿胀主要影响动作电位的平台及3相复极相,可能诱发折返性心律失常的发生。。的两种成分出现不同变化,提示低渗性肿胀对细胞膜离子通道有调节作用。。。明显增加,提示它在心室肌细胞渗透性电信号传导机制中可能起重要作用,是低渗性肿胀APD缩短的重要的离子机制。
关键词:■低渗性肿胀 一心室肌细胞 一缺血再灌注 一离子通道
■全细胞膜片钳 一延迟整流钾电流 ●恢激活成分/一慢激活成分/1动
作电位时程
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天津医科大学硕士研究生论文英文摘要
ABSTRCT
Objectives:Swelling of cardiac myocytes occurs during acute myocardial ischemia episode and this is exacerbated after electro- physiological properties of myocytes alter as a result of the membrane mechanical stretching during the cell swelling can modulate the
function of a number of membrane channels and ion transporters,which may
contribute to action potential effects will lead to changes of the membrane electrical activity and may contribute to arrhythrnogenesis under pathological