油菜籽粕生物碱对离体回肠肠管平滑肌收缩功能的作用.doc

油菜籽粕生物碱对离体回肠肠管平滑肌收缩功能的作用.doc油菜籽粕生物碱对离体回肠肠管平滑肌收缩功能的作用
油菜籽粕为油菜籽榨油后的副产物。我国的油菜种植面积和油菜籽产量均居世界第一位,油菜籽粕资源十分丰富,每年产量千万吨左右,居世界首位,但油菜籽粕的资源利用却相当有限,基本当做肥料或按少量比例添加作反刍动物和淡水鱼养殖饲料。目前对油菜籽粕中营养成分的研究主要集中于其中干物质、粗蛋白、粗脂肪、无氮浸出物、粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗灰分、钙、硒、锰、磷,尚未见到有关油菜籽粕生物碱生物学功能的报道。本研究旨在观察油菜籽粕生物碱对离体回肠肠管平滑肌收缩功能的影响并探讨机制,为油菜籽粕功能性食品或药品开发提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
①实验动物: 成年健康新西兰长耳白兔,体质量 2. 0 ~2. 5 kg,雌雄兼用,辽宁省大连市大连医科大学医学实验动物中心提供,SCXK( 辽)2013-0003。②主要仪器及试剂: Medlab-U /4C501H生物信号采集处理系统( 南京美易科技有限公司) 。
BP 211D 型电子天平( 德国赛多利斯制造) ,恒温平滑肌浴槽( 张家港市南港医疗器械厂) ,FT-100 生物张力传感器( 成都泰盟电子有限公司) 。硫酸阿托品注射液( 郑州羚锐制药股份有限公司,批号:1005051) ,***化钠( 青岛化学试剂厂,批号:050616 ) ,***化钾( 河南焦作市化工三厂,批号:990911) ,无水***化钙( 天津市广成化学试剂有限公司,批号: 20020504) ,碳酸氢钠( 山东省化工研究院,批号: 990902) ,葡萄糖( 青岛化学试剂厂,批号:040716) ,MgSO47H2O ( 开原化学试剂厂,批号:990201) ,NaH2PO42H2O( 天津市科密欧化学试剂开发中心,批号: 030828) ,皆为分析纯。油菜籽粕生物碱为本实验室自制。
1. 2 家兔离体回肠肠管的制备取禁食 24 h 家兔 15 只,槌击后枕部致死,迅速剖开腹腔,分离回肠,去除肠壁周围肠系膜,分离出长约 30 cm 的肠管,立刻置于 37 ℃充入 95% O2和 5% CO2的混合气体的台氏液中,肠管出现明显蠕动时剪成 2 cm 的肠段,用台氏液将肠内容物冲洗干净后备用。
1. 3 油菜籽粕生物碱对离体回肠平滑肌收缩频率及张力的影响观察参照文献方法,取 1. 2 制备的离体肠管,上端接肌张力换能器,下端固定于金属钩上,将固定好的肠管置于充满 20 mL 台氏液( 37 ±0. 5)
℃的麦氏浴槽中,用 Medlab-U /4C501 生物信号采集处理系统记录肌张力变化,调整标本初负荷为2. 0 g,肠管蠕动平稳 30 min 后开始试验。每次筛选13 个舒缩频率、张力稳定的肠管进行实验,向 13 个麦氏浴槽中分别加入 0、0. 5、1、2、4、6、8、10、20、40、60、80、100 μg / μL 油菜籽粕生物碱溶液,每个浓度的给药体积为5 μL,每个浓度重复 15 次实验,以0 μg/μL油菜籽粕生物碱作为空白对照,用 MedLab 生物信号采集处理系统软件记录并分析肠管的的蠕动曲线,用周期测量法测定给药后蠕动波的频率,用区间测量法测量给药后的张力。
1. 4 油菜籽粕生物碱联合阿