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学位论文作者: 日期: 年 月 日
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
人脐带源间充质干细胞对心力衰竭患者 CD4+CD25+
CD127low 调节性 T 细胞的影响
研究生:田甜导 师:徐予
郑州大学人民医院心血管内科河南郑州 450003
摘 要
背景
心力衰竭(heart failure HF)是各种心脏疾病的最终结局,具有较高的致残率和致死率,大大减低了患者的生活质量,目前研究发现免疫系统功能异常与其发生、发展有密切关系。CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞是 CD4+T 细胞亚群中表型和功能特异的一组细胞,具有免疫无能性和免疫抑制性的功能,这种功能使其能够抑制机体免疫系统的过度激活,在自身免疫病、肿瘤、移植物抗宿主病
(graft-versus-host diseaseGVHD)等疾病的治疗中发挥重要作用。目前研究证实无论何种病因导致的 HF,患者外周血中 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞比例均较正常人群显著下降,且其下降程度与 HF 严重程度呈现正相关,而给予 HF 鼠模型输注外源性 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞则可以延缓、逆转心衰进展, 提示 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞比例下降可能参与了 HF 的发生、发展,所以可以将提升 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞比例作为 HF 免疫治疗的一个新靶点。但 Foxp3 作为核内转录因子,位于细胞内,检测较为复杂,CD127 即 IL-7 受体,位于细胞表面,较容易定量测定,且研究证明 CD127 的低表达与 Foxp3 相关,与 Foxp3 相比,CD127 被认为更能作为 CD4+CD25+Treg 细胞特异的表面分子标记。间充质干细胞(mesenchymal stem cells MSCs)是一类具有免疫抑制性的多能干细胞, 其通过抑制 T、B 淋巴细胞的增殖,维持树突状细胞(dendritic cell DC)非成熟状态,改变辅助性 CD4+T 细胞亚群的表型,改变 CD8+细胞毒性 T 淋巴细胞和自然杀伤细胞的功能等发挥免疫抑制功能。研究证实,MSCs 可以剂量依赖性抑
I
制植物凝集素(phytohemagglutinin PHA) 、抗 CD3/CD28、同种异型抗原刺激
的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells PBMC)或富集的 CD3+、 CD4+或 CD8+淋巴细胞的增殖,但具体机制仍存在争议。目前研究表明 MSCs 能
够刺激活化的人外周血单个核细胞,鼠的脾细胞,分离纯化的 T-CD4+细胞产生 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞,部分学者认为 MSCs 抑制 T 淋巴细胞增殖是通过
诱导其产生 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞而间接完成的。目前关于 MSCs 对 HF 患者外周血 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞的影响未见报道,且既往对 MSCs 的免疫调节研究多针对骨髓源性间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells
BMSCs ),对人脐带源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells hUC-MSCs)的关注较少,而我们前期临床研究发现人脐带源间充质干细胞可改善 HF 患者临床症状,提高其预后,所以本研究选取 hUC-MSCs 为 MSCs
来源,初步探讨其对 HF 患者 PBMC 增殖的影响及其对 CD4+CD25+CD127lowTreg 细胞产生的影响及其相关机制,为 hUC-MSCs 治疗 HF 提供新的免疫学理论依据。
第一节 hUC-MSCs 对 HF 患者 PBMC 增殖能力的影响
目的
检测 hUC-MSCs 对 P