人凝血酶tm酶联免疫检测.doc

人凝血酶(TM)酶联免疫检测
试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人凝血酶(TM),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中凝血酶(TM)测定。
工作原理
本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人凝血酶(TM)水平。向预先包被了人凝血酶(TM)单克隆抗体的酶标孔中加入人凝血酶(TM),温育;温育后,加入生物素标记的抗TM抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人凝血酶(TM)的浓度呈正相关。
试剂盒组成
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
封板膜
2片(48)
2片(96)
密封袋
1个
1个
酶标包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
标准品1600U/L
×1瓶
×1瓶
2-8℃保存
标准品稀释液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
链霉亲和素-HRP
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
生物素标记的抗TM抗体
×1瓶
1 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
终止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
浓缩洗涤液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存
需要而未提供的试剂和器材
37℃恒温箱。
标准规格酶标仪。
精密移液器及一次性吸头
蒸馏水,
一次性试管
吸水纸
注意事项
从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作程序
标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)
800U/L
5号标准品
120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液
400U/L
4号标准品
120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液
200U/L
3号标准品
120μl的4号标准品加入120μ