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孕酮(PRG)ELISA 试剂盒.doc


文档分类:医学/心理学 | 页数:约3页 举报非法文档有奖
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孕***(PRG)ELISA 试剂盒
(德国DRG:EIA-1561)
1、前言
孕***是一种类固醇激素,含21个碳原子,在C-3上连有***基,在C-4与在C-5之间为双键连接。该类固醇激素是一种女性性激素,与雌激素共同在月经周期中调节附属的器官,它对于胚细胞着床前的子宫内膜增生状态和维持孕期是特别重要的。在非孕期妇女怀孕的胎盘成为主要来源。极少数来源于***的肾上腺皮质。孕***在循环血中主要与皮质类固醇结合蛋白(CBG),性激素结合蛋白(SHBG)和白蛋白结合,仅有循环总浓度的2-10%是游离激素。根据月经循环周期血孕***浓度范围很宽,在卵泡期可以低于1ng/ml(),在黄体期达到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天达到最高水平保持4-6天,在月经开始前24小时降至排卵前的水平,因为孕***的升高和降低与卵巢卵泡和黄体的活动相对应,因此血浆孕***的测定在临床上常用来证明排卵和非孕妇女的黄体功能正常。假如排卵没有发生,黄体则没有生成进而孕***升高的循环也不能见到,异常的孕***分泌与经前期紧张子宫内膜异位症痛经和黄体不全有关。孕***浓度不仅个体之间有差异,而且同一个人每天甚至每个小时都会不同,一般的在妇科内分泌紊乱或异常妊娠为了恰当的解释病因连续测定比单个测定更有意义。在孕期孕***更多的由胎盘产生,血浆水平在这个时期稳定在200ng/ml的水平。
2、实验原理
DRG公司的孕***酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合孕***分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性孕***的病人样本与辣根过氧酶标记的孕***竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中孕***的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中孕***的浓度成反比。
3、试剂盒成分
预包被反应板 ,12条X8孔,96孔,微孔中包被了单克隆的抗孕***抗体。
标准品系列,7支,1ml,浓度:0;;;;5;15;40ng/ml,转换系数:1ng/ml=,%的Proclin防腐剂,
酶联结物 ,1支,25ml,辣根过氧酶标记的孕***,%的Proclin防腐剂。
底物液,1支,25ml,TMB
终止液,1支,14ml,
浓缩洗涤液(40X),1支,30ml.
注:用于样品稀释的零标准品应视需要而定。
4、实验需要器材(但试剂盒不提供)
酶标仪(450±10nm)。
移液器
吸水纸
蒸馏水
5、试剂贮存:
未开启的试剂在2—8℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于2—8℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。
6、试剂准备
实验开始前,将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。
洗涤液:在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释,稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。
7、样本采集和准备
此实验中要使用到血清或血浆(EDTA-,肝素血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含叠氮钠的样品不能用于此实验中。

血清:静脉

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