[硕士论文]腺病毒介导的Vasostatin基因治疗胰腺癌的基础研究.pdf

上海第二医科大学
博士学位论文
腺病毒介导的Vasostatin基因治疗胰腺癌的基础研究
姓名:李雷
申请学位级别:博士
专业:内科学(消化系病)
指导教师:袁耀宗
20050401
缩略词表中文全称缩写英文全称美国模式生物中心细胞周期素依赖性激酶二氨基联苯胺二甲基亚砜胎牛血清腺病毒碱基对绒毛尿囊膜实验巨细胞病毒细胞病理学效应焦碳酸二乙酯培养基二硫苏糖醇乙二胺四乙酸流式细胞仪苏木精和曙红人脐静脉内皮细胞千碱基对培养基多克隆位点感染复数微血管密度凋亡指数小牛血清白蛋白互补千道尔顿上海第娇拼笱Р┦垦宦畚’
日期:勤蚪习⋯一繇巷雷⋯名::弘艺∽‘日期纾荷海簔日期:∞徽学位论文独创性声明学位论文使用授权声明;成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第拼笱в泄乇A簟⑹褂醚宦畚牡墓娑ǎS阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。作者签名:
腺病毒介导治疗胰腺癌的基础研究;黪中文摘要方法背景与目的并将其装载于腺病毒载体内,观察腺病毒介导的基因对人胰腺癌裸鼠移胰腺癌在西方国家肿瘤相关死亡率中列第五位,以手术效果差、对放疗、化疗不敏感等为临床特征。肿瘤的生长与转移依赖于血管生成,抗血管生成治疗成是一种有潜力的抗血管生成的蛋白质。本研究拟克隆编码的基因片段,植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制。断,定向插入腺病毒穿梭质粒—细胞病毒启动子的下游,获得重组质粒—,进行酶切、测序鉴定。盖邢咝曰闹刈榇┧笾柿W;疎...惺芴妇邢妇谕粗刈椤=ǹ剐陨秆『兔盖屑ㄕ的重组质粒瓹H细胞进行包装。病毒扩增纯化后,病毒感染人胰腺癌细胞,和印迹法检谋泶镒纯觥粗迫艘认侔┞闶笠浦擦瞿P停瞿谧⑸.、瓹癙,观察移植瘤的生长曲线、瘤重及抑瘤率,并进行增殖性细胞核抗原的免疫组化检测和肿瘤组织原位细胞凋亡的检测。τ眯」苄纬墒笛檠芯縑蕴逋庋9苌傻挠跋欤üε呷毛尿囊膜实验观察对体内血管生成的作用,应用免疫组化法检测肿瘤微廊管密度研究对胰腺癌移植瘤血管生成的影响。法观察基因对人胰腺癌细胞、人脐静脉血管内为新的治疗选择。是集钙蛋白氨基末端的含个氨基酸残基的片段,匀思∪鈋目馕D0逵τ肞的方法扩增出的τ玫绱┛追ń玃皮细胞的体外细胞增殖的影响。上海第娇拼笱Р┦垦宦畚
镦,统计数据显示瓹浦擦隽鲋叵灾∮./《局刈橹柿—构建成功;转染赴天后观察细胞病理学效应出现。ū砻榧癙组,橐浦擦隽鲋匚±..显著小于原位细胞凋亡检测显示,瓹橐浦擦鲎橹南赴蛲鲋甘性差,可见条索状的细胞链,但是中空的闭合的管状结构缺如,鸡胚绒毛尿囊膜实验提示组的血管纹理欠清晰,小血管分布凌乱、稀疏,形组及。免疫组化结果提示,;際赜ü馊旧ā⒘魇礁侔茿/取染法检测人脐静脉血管内皮细胞的凋亡。。那霉素抗性筛选及重组腺病毒中含有片断。和迹法证实及蛋白的表达。瘟坪周狢橐浦擦龅奶寤灾∮组移植瘤瘤重为琾—组移植瘤瘤重为狢组甇%及....%灾笥趐—组.%及」苄纬墒笛閝—组细胞数目较少,细胞排列连续态不规整,小血管的分支少,多数在第二第三级,极少数达到第四级。肿瘤生长芎髉—移植瘤瘤重±显著小于狢逋庀赴鲋呈笛橹校赩蚨匀艘认侔㏒赴饔上海第:医科大学博士学位论文±.
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