[优秀论文]大肠癌中端粒酶及其组分hTR、hTERT的表达及意义.pdf

上海第二医科大学
硕士学位论文
大肠癌中端粒酶及其组分hTR、hTERT的表达及意义
姓名:许伟青
申请学位级别:硕士
专业:病理学、肿瘤病理生物学
指导教师:赵雁飞

大肠癌中端粒酶及其组分的表达及意义摘要采用免疫荧光方法检测大肠癌培养细胞中谋泶铩#峁⑾郑簂大肠癌于高、中分化癌。蟪Π┫赴衕表达较强,其分布主要位于胞浆内。关键词:大肠癌端粒酶硕士毕业论文大肠癌中端粒酶及其组分的表达及煎墨为了探讨端粒酶及其组分在大肠癌中的表达,以及端粒酶表达与大肠癌发生、发展及细胞增殖的关系,本研究采用改良的法检测大肠癌细胞株及大肠癌组织中端粒酶活性;用原位杂交、免疫组化方法分别检测大肠良、恶性病变的石蜡标本中端粒酶乖蚿蛋白的表达;细胞株及例大肠癌组织端粒酶均阳性。蟪Π﹉的表达率和表达强度显著高于大肠良性病变蟪Π┧娣只潭认陆怠⒔笊疃仍黾雍土馨结转移的发生,/~十叨嗉诘汀⒅蟹只琍瘆者多见结论:大肠癌中端粒酶的高活性表达表明其与大肠癌发生、发展密切相关。端浸润及转移相关。泶镉胂赴鲋郴钚韵喙亍表达与鞍赘谋渲间也具有一定的相关性,二者协同检测更能反映肿瘤的恶性倾向。大肠癌的表达较鞍椎谋湟旄咛匾煨浴6肆C竓抗体的应用将为原位检测端粒酶表达提供新的手段,有助于肿瘤的诊断。粒酶泶镌诖蟪α肌⒍裥圆”渲写嬖谙灾钜欤襤表达与肿瘤分化、\●.~,
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堡主芝些笙奎查堕些±塑垫壁墨茎望坌坚堕塑墨竺丝童墨挂前言大多数恶性肿瘤细胞中有端粒酶活性表达。端粒酶活化使细胞具有无限增殖的能端粒是真核细胞染色体末端由重复蛄<相关蛋白质组成的特异结构。经若干次细胞分裂后,端粒长度逐渐缩短,细胞发生衰亡。端粒酶是由偷鞍字首槌傻暮颂呛说鞍赘春衔铮有逆转录酶的活性,能合成端粒序列,维持端粒长度的恒定。实验表明,正常人体细胞诚赴⒃煅8上赴韧端粒酶处于失活状态,而永生化细胞及力,与细胞永生化及癌变密切相关。近年来在肿瘤研究中发现,许多肿瘤组织中端粒酶阳性率高达癌旁正常组织或良性病变中阳性率仅为ィ崾径肆C富钚栽诹级裥圆”渲存在显著差异,而且端粒酶活性水平与肿瘤浸润、转移能力及预后相关。国外已将端粒酶活性检测用于多种细胞标本的肿瘤诊断中,具有广泛的应用价值”D前随着端粒酶基因组分的克隆,对端粒酶的研究又有了新的认识。人端粒酶主要/,H硕肆C窻对细胞端粒的合成起到模板作用,在肿瘤发生早期就有泶锏纳系鳎襤的表达与细胞增殖活性密切相关口与四膜虫端粒酶蛋白嗨疲芴匾斓亟岷隙肆C窻。人端粒酶逆转录酶被认为是端粒酶的催化亚基。有人在体外将蜃B肌⒎牒螅雋可使端粒酶活性降低或消失,因而证明榉质蔷龆ǘ肆C富钚缘闹饕R素【俊Q芯勘砻鳎琱及谥琢鲋芯8弑泶铮浔泶锍潭瓤杉浣臃从扯粒酶活性。关于肿瘤细胞中端粒酶活化的调控机制,迄今尚未阐明,周期调控蛋白、癌基因、抑癌基因、转录因子等都可能参与酶活性的调节。有实验表明,一些细胞周期调控蛋白的异常表达与端粒酶活化有关。在/毕莸墓侨饬鱿胞系中,诱导功能性脑俦泶铮墒苟肆C富钚韵陆怠。在人乳腺癌中抑制端粒酶活性也己成为肿瘤治疗研究的新热点,人们试图通过阻断0濉有三种成分组成,即端粒酶八,鞍重组,可表达端粒酶活性;而改变孀B济腹δ芮哪承┌被嵝蛄校蛋门失表达,同时伴有墓泶铮蚨肆C富钚栽龈摺】。此外,ァ和痗●,■.一
堡主兰些堡苎查暨堡芗岫槟淹坚:坚苒阵盟苣ā[有汀!!!!!!!!!!!R逆转录酶抑制剂、诱导蛲槐浠蚍匆灞泶铩⒂盏挤只鹘凇⒆B家蜃大肠癌是一常见肿瘤。大肠癌的发生是一多阶段、多步骤的演变过程,运用分子生物学技术已发现在大肠癌形成过程中有多种基因的变异。目前研究表明”%的大肠癌中端粒酶呈高活性表达,而在大肠良性病变中,其活性较低,而且随肿瘤进展,端粒酶活性逐渐增高。国内有关大肠癌端粒酶活性的研究并不多,本课题研究主要包括:捎肨方法检测人大肠癌细胞株及大肠癌组织中端粒酶活性,探讨端粒酶在人大肠癌中大肠炎性病变的石蜡标本中端粒酶⑾赴鲋诚喙乜乖璌拖赴芷诘活化与细胞增殖、鞍赘谋渲实墓叵担L剿鞔蟪Π┓⑸铺峁┬碌娜识。捎妹庖哂ü饧浣臃ḿ觳獯蟪Π┡嘌赴卸肆C竓的表达,了解鞍自诖蟪Π┫赴械谋泶锛胺植迹⒊跆狡湓谥琢稣锒戏矫娴挠τ们调控等多种途径,达到治疗肿瘤的目的。关于大肠癌中端粒酶组分表达的研究,目前国内外文献也少有报道。的表达情况;迷辉咏弧⒚庖咦榛椒ǚ直鸺觳獯蟪Π⒋蟪ο倭龊筒糠控蛋白谋泶铮教謍表达在大肠癌发生、发展中的作用,以及端粒酶景。
第一部分大肠癌中端粒酶活性的检测材料与方法硕士毕业论文大肠癌中端粒酶及其组分的表达建璺墨兰塑端粒酶是维持