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基因工程的基本操作程序的步骤.ppt

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文档列表 文档介绍

用切目的基因相同的限制性内切酶切割质粒
目的基因
专题1 基因工程
目的基因的检测与鉴定
基因工程的基本操作程序的步骤:
目的基因的获取
基因表达载体的构建
将目的基因导入受体细胞
阅读与思考
1、什么是目的基因?
2、获取目的基因的方法有哪些?其操作过程分别是怎样的?
一、目的基因的获取
1、目的基因概念:
主要是指编码蛋白质的基因。
(人类所需要的基因,如:抗虫基因、胰岛素基因)
也可以是一些具有调控作用的因子。
2、目的基因获取的方法:
从基因文库中获取目的基因
利用PCR技术扩增目的基因
化学方法直接人工合成目的基因
(一)从基因文库中获取目的基因
基因文库
定义(见课本P9)
种类
基因组文库
部分基因文库
(如cDNA文库)
基因组文库的构建过程
基因组文库
限制酶
供体细胞的
全部DNA
大量DNA
片段
拼接到载体上
导入受体细胞扩增
cDNA文库的构建过程
mRNA
单链DNA
双链DNA
反转录
cDNA文库
互补合成

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