3高效液相色谱法及应用.ppt

第三讲:
高效液相色谱法及应用
2004年3月14日
慢
中等
快
色谱分离
Temporal
course
淋洗液
由于液体与气体性质的以下差异:
溶质在液体中的扩散系数比它在气
体中小105倍左右
液体粘度比气体约大102倍
液体表明张力比气体大104倍左右
液体密度比气体约大103倍
液体不可压缩
液相色谱以液体为流动相,固定相可以是固体或液体(担载在固体表面),与气相色谱比,带来一系列变化:
例如,填充柱气相色谱柱,一般填料的尺寸为80-100目,粒度大约是2毫米,而一般高效液相色谱的固定相粒度在2-10微米,因此流动相通过这样一段固定床时就产生了很高的反压。
因此,我们通常所说的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography)实际也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography),因为没有很高的压力就不可能产生很高的分离效率。
键合相高效液相色谱算是一种色谱模式,因为用的是键合相的固定相。
一、液相色谱的分类
按溶质在分离过程中的原理:
吸附色谱
分配色谱
离子交换色谱
体积排阻色谱
亲和色谱
:
平板色谱(平面色谱)
柱色谱

高压液相色谱(高效液相色谱)
中压液相色谱
常压液相色谱
H-dp关系图
二、液固色谱法
一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色谱法的固定相一般为固体吸附剂,常用的是:碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常用。
吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离,而对强极性或离子型的样品,有时会发生不可逆吸附,不能得到满意的结果。
基本原理:
吸附剂一般为多孔性的物质,在它们的表明存在着分散的吸附中心,溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争,同时不同溶质之间和同一溶质的不同官能团之间液也存在竞争。竞争的综合结果就是形成不同溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。