生物参考资料参数检测复习题.doc

简述“味精中铁的测定”的实验原理。
答:磺基水杨酸(结构式)在碱性条件下与二价铁离子被空气氧化为三价铁离子,而使颜色加深,味精成品中铁含量要求在5ppm以下。Fe3+3Sal- =Fe(Sal)33-。在碱性溶液中二价铁离子能迅速被空气氧化,故不需另加氧化剂。
简述“吸附柱层析”工作的基本原理。
答:吸附层析是利用吸附剂对不同物质吸附力的差别而达到分离的方法。吸附柱层析的过程可简要说明如下;装置如图5-1(1),用一根玻璃管,底部放些棉花或玻璃纤维,管中填入吸附剂(如氧化铝的粉末),这样就形成了一个吸附柱。然后在顶部加入待分离的样品溶液,设样品内含有两种组分A和B,则两者都被吸附剂留在柱的上端形成一个色带。图5-1(2)(3),图中的虚线是溶液中溶剂前沿到达的地方。样品溶液全部流入吸附柱中后,接着就加入纯溶剂冲洗,管内就连续不断地发生解吸、吸附、再解吸、再吸附的过程。例如被吸附的A组分被溶剂所解吸而随溶剂向下移动时,又遇到新的吸附剂颗粒,重新把A自溶液中提出而被吸附,当继续流下的新溶剂再次把A解吸向下移动,然后再被吸附,这样经过一段时间以后、A就会向下移动至—定距离。同理B也向下移动,由于溶剂及吸附剂两者对A与 B的解吸力与吸附力不同,A与B所移动的距离也就不同。吸附力较弱的与解吸力较强的组分(如A),移动距离也就大些,经过适当时间以后, A与B就可以完全分开,形成两个区带,每一区带内是一种纯物质。如果A与B有颜色,就可清楚地看到色带,如图5-1(4)(5)。加入的溶剂称为“洗脱剂”,冲洗过程称为“洗脱”或“展开”,管下流出的液体称为“流出液”或“洗脱液”。
3、简述“原料中磷的测定”的实验原理。
答:磷与钼酸铵、***化镁作用,生成磷酸铵镁,经灼烧后生成焦磷酸镁,称重,即为重量法。若将磷酸铵镁沉淀过滤,用EDTA滴定过量的***化镁,即为容量法。将磷与钼酸铵作用,生成磷钼酸铵,在酸性条件下,用维生素C还原,生成钼蓝,即为比色法。
重量法测磷原理是将试样经硫酸、***消化后,在酸性条件下与钼酸盐反应,生成磷钼酸铵沉淀,沉淀溶于氨水中,经酸中和,与***化镁反应,生成磷酸铵镁沉淀,然后将磷酸铵镁灼烧为焦磷酸镁,称重。
简述薄层层析展开剂的选用原则。
答:在吸附层析中,当所用吸附剂已定,则对同一化合物的解吸能力与展开剂的极性有关,极性大则洗脱能力也大,即在薄层上斑点展开距离越远,Rf值也越大。
薄层层析所用展开剂主要是低沸点的有机溶剂,并须加以精制。一般使用2~3种组分的多元溶剂系统。对于薄层所用的展开剂的选择原则与吸附柱层析一样,也是根据溶剂的极性、被测物质的极性及吸附剂的活性三方面来考虑。
如果选择不当,就会出现物质被带到溶剂前沿,不形成斑点,而成为和溶剂前沿一致的一条带状,或被留在原点,或上升距离很小,分离效果不好等。
在吸附剂、展开剂、样品三因素中,实际上样品的极性与吸附剂的吸附能力都是在一定情况下恒定的因素,因此,分离效果主要取决于展开剂。通常可以先选择某一种溶剂,根据物质在薄层上的分离效果,再加减其他溶剂来调节极性大小。
对于有机酸及生物硷等极性很强的物质,在所选的展开剂中,常加入少量乙酸或乙二***等酸碱性溶剂,以抑制其形成复斑或拖尾现象。
5、简述“凯氏定氮”的实验原理及结果计算。
答:原理是将试样与浓硫酸共热消化,使蛋白质分解