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第七节双向电泳ppt课件.ppt

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第七节双向电泳
定义:将样品进行电泳后,为了不同的目的在它的垂直方向再进行一次电泳的方法。
双向电泳的种类:
第一向等电聚焦,第二向SDS电泳
第一向SDS电泳,第二向等电聚焦。
常用的双向电泳为第一向等电聚焦,第二向SDS电泳。
第一向:等电聚焦
载体***电解质PH梯度
固相PH梯度(IPG):
固相pH梯度
为拥有CH2=CH-CO-NH-R结构的8种丙烯酰***衍生物系列,其中R包含羧基或叔氨基团,它们构成了分布在pH3~10不同值的缓冲体系。
不产生阴极漂移、PH梯度稳定、分辨率高、重复性好。
双向电泳在在制药工程中的应用
药物及药物靶点的识别
疾病标记蛋白的识别
药物毒理学研究
药物合成过程中相关酶系的研究
蛋白质间的相互作用
IPG胶条的蛋白质大约载样量
IPG Strip length
Analytical Load
(silver staining)
Preparative Load
(Coom staining)
7cm
10~100  g /125  l
200~500ug/125  l
11cm
50~200  g /185  l
250~1000ug/185  l
17cm
100~300  g/300  l
1~3mg/300  l

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